目前流行的常见精神药物包括甲基苯丙胺（冰毒）、海洛因、氯胺酮（K粉）、可待因、可卡因等。生物检材中常见精神药物的检测结果通常是重要依据。与血、尿等其他生物检材相比，毛发具有易获取、易保存、目标物稳定、检测时限长等优点。因此，毛发中常见精神药物的检测吸引了各国科学家的广泛关注，目前已发展出多种毛发样品的前处理和检测方法。其中，高效液相色谱-串联质谱法的应用最为广泛。毛发的前处理方法包括碱性或酸性溶液消解、溶剂浸泡过夜、混合溶剂超声波提取、酶水解法等。然而上述前处理方法使用大量溶剂，且提取时间较长（10小时以上），因此亟待开发环保、高效的提取方法。超临界二氧化碳萃取（SFE）是一种新型的分离技术，具有操作简便、环保、高效等特点。该技术利用超临界二氧化碳的高效萃取能力，极大地提高了目标物的提取效率，避免了固相萃取净化等前处理步骤，已被广泛应用于医药、食品及玩具检测等方面，但在法医毒物领域的应用相对较少。Sachs等首次开发了检测毛发中毒品的超临界二氧化碳萃取结合气相色谱－质谱联用技术。Allena等在26.2MPa和70摄氏度条件下，以氯仿和异丙醇（90：10，体积比）为添加剂进行超临界二氧化碳萃取30分钟，方法适用于毛发中苯丙胺类物质的检测。Cirimele等在31.03MPa和25摄氏度条件下，以甲醇－三乙胺－水（2：2：1，体积比）为添加剂进行超临界二氧化碳萃取20分钟，方法适用于毛发中阿片类物质的检测。Brewer等在29.6MPa和145摄氏度条件下，以甲醇为添加剂进行超临界二氧化碳萃取80分钟（静态萃取5分钟，动态萃取75分钟），方法亦适用于毛发中阿片类物质的检测。但是以上超临界二氧化碳萃取方法只适用于单一种类精神药物，且总体萃取效率低。本文通过改进毛发样本包裹材料以及萃取夹带剂体系，优化超临界二氧化碳萃取条件，并结合高效液相色谱-串联质谱，开发了一种具有普适性的毛发中11种常见精神药物的提取和检测方法。甲基苯丙胺、苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺（MDMA）、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、氯胺酮、去甲氯胺酮、可卡因、苯甲酰爱康宁、6-单乙酰吗啡、吗啡、可待因标准品（质量浓度均为1.0mg/mL）；乙腈、甲醇和正己烷为色谱纯（99.99%）；乙酸铵、甲酸为质谱纯；三氟乙酸（99.9%）；实验用水由Milli-Q纯水系统制备；钢丝网（300、800目）。标准储备液（1.0ug/mL）：准确量取质量浓度均为1.0mg/mL的11种精神药物标准品10uL，分别置于10mL容量瓶中，用少量甲醇溶解后定容至刻度，即得。标准曲线样品：将1.0ug/mL标准储备液分别稀释10倍和100倍，得到100、10ng/mL的标准液，精确称量（20.0±0.1）mg空白毛发各6份，加适量丙酮至完全浸没毛发后，依次添加20uL10ng/mL的标准液，10、20、80uL100ng/mL的标准液，以及10、20uL1.0ug/mL的标准液，充分振荡摇匀后过夜至丙酮挥干，得到毛发中加标量为0.01、0.05、0.1、0.4、0.5、1ng/mg的样品，经SFE萃取后，氮气吹干，添加100uL甲醇稀释，得到质量浓度分别为2、10、20、80、100、200ng/mL的标准曲线样品，采用基质匹配标准曲线定量。依次用超纯水和丙酮对毛发样品进行洗涤，晾干后剪碎至0.1-0.5mm长。萃取系统空白样品：制备钢丝网包（300-00目，1cm×1cm），不添加任何样品，用于监控萃取系统是否有干扰。空白毛发样品：准确称量20mg剪碎后的空白毛发样品，置于上述钢丝网包中待测，以11种常见精神药物均为未检出进行空白确认，用于后续标准曲线建立以及方法精密度和回收率实验。添加样品、质控样品：准确称量20mg剪碎后的无吸毒人员毛发样品，添加一定量混合标准溶液，晾干后置于钢丝网包中，待测。实际毛发样品：准确称量20mg剪碎后的吸毒人员毛发样品，洗涤晾干后置于钢丝网包中，待测。将包裹20mg毛发样品的钢丝网包置于萃取釜中；控制夹带剂（5%三氟乙酸-95%甲醇）以1.5mL/分钟流入萃取釜中，保持1分钟后关闭；调节CO2流速至8mL/分钟，将萃取釜升温至130摄氏度，出口温度设为60摄氏度，待温度稳定后开始增压。当压力增至31.03MPa，开始计算静态萃取时间，4分钟后打开夹带剂泵，以0.5mL/分钟流速添加至萃取釜内，同时打开萃取釜出口阀门，开始计算动态萃取时间，收集5分钟后完毕；浓缩后定容至100uL上机分析。以最具代表性的6-单乙酰吗啡、甲基苯丙胺、可卡因、氯胺酮为目标物制备加标0.2ng/mg的毛发样品，甲醇为夹带剂，分别考察了SFE萃取温度、压力以及静态和动态萃取时间对萃取效率的影响。结果显示，萃取效率随着萃取温度的升高而增大，温度达130摄氏度时的萃取效率最高，随着温度进一步升高，萃取效率有所下降，这可能是由于毒品在高温下部分分解所致。而萃取压力对4种毒品萃取效率的影响较为平缓，随着压力的升高，萃取效率有所提升，当压力达31.03MPa时，萃取效率最高，此后增加萃取压力，萃取效率变化不大。此外，延长静态和动态萃取时间有助于增加4种毒品的萃取效率，但静态和动态萃取时间分别超过4、5分钟后萃取效率反而下降。综上，确定最佳SFE萃取温度为130摄氏度，压力为31.03MPa，静态和动态萃取时间分别为4、5分钟。取空白毛发样品分别进行3个浓度水平（0.05、0.20、0.40ng/mg）的加标回收实验，按照本方法平行测定6次，计算其回收率和相对标准偏差（RSD）。11种目标化合物在3个加标水平下的回收率为81.6%-94.8%，RSD为0.50%-3.4%。取20mg实际吸毒人员的毛发样品，按照本方法进行前处理和检测。典型样品（编号SZNTMF0007）的MRM图谱该样品检出6-单乙酰吗啡、可待因及吗啡，含量分别为6.0、12、14ng/mg，其中6-单乙酰吗啡为海洛因的特征代谢物，与吸毒人员吸食海洛因的事实相吻合。样品SZNTMF0008检出甲基苯丙胺和苯丙胺，含量分别为51、10ng/mg，与吸毒人员吸食冰毒的事实相吻合；样品SZNT-MF0009检出氯胺酮、去甲氯胺酮和3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺，含量分别为16、7、54ng/mg，与吸毒人员吸食K粉（氯胺酮）的事实相吻合；样品SZNTMF0010检出可卡因、苯甲酰爱康宁以及甲基苯丙胺，含量分别为35、25、38ng/mg，与吸毒人员吸食可卡因和冰毒的事实相吻合；样品SZNTMF0011检出苯丙胺、甲基苯丙胺、氯胺酮以及去甲氯胺酮，含量分别为16、36、30、19ng/mg，与吸毒人员吸食冰毒和K粉的事实相吻合。分别采用本方法的SFE条件与最新发布的司法鉴定技术规范SF/ZJD0107025-2018的前处理条件对SZNTMF0008样品进行处理，采用标准方法检出甲基苯丙胺和苯丙胺的含量分别为43、8.9ng/mg。本方法的定量结果略高于标准方法，主要原因是标准方法采用甲醇冰浴超声提取30分钟，提取温度低使得提取效率略有下降。另取SZNTMF0008样品经剪碎（0.1-0.5mm）处理，与液氮冷冻研磨处理后进行SFE提取对比，发现后者的定量结果略高，检出甲基苯丙胺和苯丙胺的含量分别为76、18ng/mg。主要原因是毛发样品经磨碎后目标物更易被提取。综合考虑前处理效率，本研究采用简易的毛发剪碎前处理方法。本文建立了一种超临界二氧化碳萃取结合高效液相色谱－串联质谱对毛发中11种常见精神药物进行定性和定量的检测方法。该方法可在7分钟内实现11种待测物的良好分离，精密度、线性关系和灵敏度等指标满足人体毛发中常见精神药物的分析要求，可提供有力的技术支持。文章来源：分析测试学报2019年8月珍爱生命 远离毒品}