谷氨酸含量测定方法微量法检测血清谷氨酸含量测定方法,90度煮完之后里面有沉淀,正常吗是需要离心取上清测紫外分光光度吗?


血细胞瘤细胞系
血细胞瘤细胞系操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,血细胞瘤细胞系此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!细胞传代培养(消化法)具体操作:一:传代前准备;1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。6.取出预热好的培养用液:血细胞瘤细胞系取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。二:胰蛋白酶消化;1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。2.血细胞瘤细胞系显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。三:吹打分散细胞;1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。四:分装稀释细胞;1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。五:继续培养;用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。血细胞瘤细胞系传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。XY1777293T/17人胚肾细胞,293T/17细胞XY17781肝细胞XY1779129小鼠ES细胞,E14细胞XY1780129小鼠ES细胞,D3细胞XY1781(舌鳞癌细胞,Tca-8113细胞XY1782(卵巢癌细胞,HO-8910细胞XY1783(急性粒细胞白血病细胞)HL-60?细胞XY1784(肝癌细胞,SK-HEP-1细胞XY1785(膀胱鳞癌细胞,SCaBER细胞XY1786(胚肾细胞,)?AAV-293细胞XY1787转化的非洲绿猴肾细胞,COS-7(SV40细胞XY1788中国仓鼠卵巢细胞,CHO细胞XY1789乳腺管癌T47-D细胞XY1790人正常皮肤细胞,Hacat细胞XY1791人胃腺癌细胞(低分化)HumanBGC-823细胞XY1792人乳腺导管癌细胞,BT474细胞XY1793人前列腺正常细胞,rwpe2细胞XY1794人胚肾细胞,293[HEK-293]细胞XY1795人结肠癌细胞,HCT-8细胞XY1796人肝癌细胞,hep3B细胞XY1797回盲肠腺癌HCT-8细胞XY1798骨髓瘤细胞株U266细胞XY1799肝转移癌HCCLMS细胞XY1800分泌A2抗体B淋巴细胞,BB7.2细胞XY1801低分化胃腺癌BGC-823细胞XY1802大鼠肾细胞,NRK-52E细胞
造血细胞培养基
造血细胞培养基HematoGroMedium(HemGM),whenusedwithHematoGroSupplement(HemGS,Cat#5552)isacompletemediumdesignedforshort-termmaintenanceofhematopoieticcellsinvitro,includingbonemarrowmononuclearandperipheralbloodcells.Itisasterile,liquidmediumwhichcontainsessentialandnon-essentialaminoacids,vitamins,hormones,organicandinorganiccompoundsandbovineserumalbumin.ThemediumisHEPESandbicarbonatebufferedandhasapHof7.4whenequilibratedinanincubatorwithanatmosphereof5%CO2/95%air.Thismediumdoesnotcontainserum,growthfactorsorcytokines.Supplementationwithadditionalfactorsmaybeusedtosupporttheproliferationordifferentiationofselectcellsubpopulations.CatalogNo.5501CountryofManufactureUnitedStatesProductCode造血细胞培养基HemGMSize/Quantity500mlProductUseHemGMisforresearchuseonly.Itisnotapprovedforhumanoranimaluse,orforapplicationininvitrodiagnosticprocedures.StorageStorethebasalmediumat4°CandtheHemGSandP/Ssolutionat-20°C.Protectfromlight.ShippingInfoBasalmedium:roomtemperature.Supplements:dryice.造血细胞培养基产品使用仅供研究使用。禁止用于人类或动物使用,或在体外诊断。产品优势:l化学成份明确,完全不含任何动物来源的成份l严格按照cGMP标准生产,内毒素含量小于0.25EU/mll培养性能优越,支持高密度单核细胞培养造血细胞培养基产品应用:lDC细胞、CIK细胞和NK细胞的长期增殖培养lPBL细胞和TIL细胞的长期增殖培养l单核细胞和巨噬细胞的长期增殖培养lT淋巴细胞的长期增殖培养注意事项:1、培养基长期放置,需要2-8℃避光保存,请勿低温冻存。2、培养基中添加的L-谷氨酰胺在溶液中不稳定、易分解,长期放置后使用若发现细胞生长变慢可在使用前加入适量的L-谷氨酰胺,来维持细胞的正常代谢。3、含有NaHCO3的培养基开瓶次数较多后,培养基内的CO2会逐渐溢出,PH值上升,培养基的颜色会偏紫色。培养基偏碱性会造成细胞生长停滞或死亡,建议分装成小瓶使用或用HEPES调至正常PH范围。YBC3226人高转移肺癌细胞95-DYBC3227人肺癌细胞Calu-1YBC3228人肺腺癌细胞NCI-H1975YBC3229人神经母细胞瘤细胞IMR-32YBC3230人大细胞肺癌细胞NCI-H661YBC3231人非小细胞肺癌细胞NCI-H1299YBC3232人横纹肌瘤细胞A-673YBC3233人恶性胚胎横纹肌瘤细胞RDYBC3234人SV40转染成骨细胞hFOB1.19YBC3235人骨肉瘤细胞MG-63YBC3236人软骨肉瘤细胞SW1353YBC3237人骨肉瘤细胞U-2OSYBC3238人骨肉瘤细胞MNNG/HOSCl#5[R-1059-D]YBC3239人成骨肉瘤细胞Saos-2YBC3240人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)KP-N-NSYBC3241人脑星形胶质母细胞瘤U-87MGYBC3242人神经母细胞瘤细胞SH-SY5YYBC3243人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE(2)YBC3244人神经母细胞瘤细胞SK-N-SHYBC3245人胶质瘤细胞SHG-44YBC3246人胶质瘤细胞U251YBC3247人胶质母细胞瘤细胞A172YBC3248人恶性黑色素瘤细胞A-375YBC3249人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM[CCRFCEM]YBC3250人Ph+急淋白血病细胞系
血细胞蛋白提取试剂盒
血细胞蛋白提取试剂盒产品概述血细胞蛋白提取试剂盒适用于从各种动物全血细胞中提取总蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gelshift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。保存温度2-8℃注意事项1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。3.试剂拆封后请尽快使用完!有效期一年检测方法WB,IP等适用样本动物血细胞产品特点1.使用方便,将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。产品应用WB,IP等仪器准备1.离心机2.振荡器3.涡旋混匀器4.移液器5.冰箱6.冰盒试剂准备1.PBS缓冲液2.蛋白定量试剂盒耗材准备1.离心管2.吸头3.一次性手套使用注意事项:?旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。?蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。?实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。?蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。?如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。?可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。?下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂,注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。使用方法1.提取液准备:每500ul冷的血细胞蛋白提取液中加入1ul蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。2.取500ul新鲜抗凝血,3000×g离心10分钟。3.移除上层血浆,收集下层血液细胞沉淀。4.用PBS洗涤血细胞沉淀2次。5.加入500ul-1ml冷的蛋白提取液,吹打混匀后,在4℃条件下振荡20-30分钟。6.在4℃,12000-14000×g条件下离心10分钟。7.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到血细胞总蛋白。特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
血细胞活性氧检测试剂盒-红色荧光
血细胞活性氧检测试剂盒-红色荧光保存温度-20℃避光注意事项1.避免反复冻融。2.可以根据需要分装后冻存。3.探针为DMSO溶液,在2-8℃时是固体状态,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。有效期6个月检测方法1.荧光分光光度计2.荧光酶标仪适用样本血细胞产品特点1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测;2.背景低,灵敏度高;3.线性范围宽,使用方便。仪器准备1.荧光分光光度计或荧光酶标仪,2.离心机3.移液器4.冰箱5.冰盒试剂准备纯水或PBS缓冲液或者HBSS耗材准备1.离心管2.吸头3.一次性手套4.荧光专用黑色透明底96孔板使用注意事项1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。2.荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。3.探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底96孔细胞培养板。6.以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整或参考文献。特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
血细胞瘤细胞系,Ramos细胞
血细胞瘤细胞系,Ramos细胞原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养法有组织块培养和分散细胞培养。细胞株(CellStrain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株。细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞株是细胞系的真子集。血细胞瘤细胞系,Ramos细胞实验操作步骤a.采用认可的方案处死啮齿动物。b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。细胞优点1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结血细胞瘤细胞系,Ramos细胞构功能和生命活动。2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广。5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化。6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。血细胞瘤细胞系,Ramos细胞本公司提供原代及传代细胞、复苏及冻存、悬浮及贴壁、国外及国内细胞,我们拥有多国品牌细胞库的细胞,有着多年的细胞培养经验,客户可信赖使用。开学大促销细胞名称:hz11655串珠镰刀菌hz11656串珠镰孢hz11657出芽短梗霉hz11658出血性大肠埃希氏菌hz11659臭曲霉hz11660迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌hz11661成纤维细胞,PA317细胞hz11662成纤维细胞,L929细胞hz11663成骨肉瘤细胞,Saos-2细胞hz11664潮湿纤维单胞菌hz11665肠炎沙门氏菌肠炎亚种hz11666肠炎沙门氏菌hz11667肠埃希氏菌hz11668长双歧杆菌hz11669长根菇(长根奥德磨)hz11670长臂猿淋巴瘤MLA-144细胞hz11671长鼻袋鼠肾细胞,PtK1(NBL-3)细胞hz11672产朊假丝酵母hz11673产气荚膜梭菌hz11674产气肠杆菌hz11675产黄纤维单胞菌hz11676产EBV的绒猴白细胞,B95-8细胞hz11677草鱼肾脏细胞,CIK细胞hz11678草鱼肝脏细胞,L8824细胞hz11679仓鼠肾成纤维细胞,BHK-21细胞hz11680仓鼠肾成纤维细胞,BHK-21[C-13]细胞,hz11681仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1细胞,hz11682仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1-EGFP细胞hz11683仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷CHO/dhFr细胞,hz11684
造血细胞磷酸酶抗体
Quantitysize:0.2mlConcentration:1mg/ml造血细胞磷酸酶抗体Buffer=0.01MTBS(pH7.4)with1%BSA,0.03%Proclin300and50%Glycerol.Background:Theproteinencodedbythisgeneisamemberoftheproteintyrosinephosphatase(PTP)family.PTPsareknowntobesignalingmoleculesthatregulateavarietyofcellularprocessesincludingcellgrowth,differentiation,mitoticcycle,andoncogenictransformation.N-terminalpartofthisPTPcontainstwotandemSrchomolog(SH2)domains,whichactasproteinphospho-tyrosinebindingdomains,andmediatetheinteractionofthisPTPwithitssubstrates.ThisPTPisexpressedprimarilyinhematopoieticcells,造血细胞磷酸酶抗体andfunctionsasanimportantregulatorofmultiplesignalingpathwaysinhematopoieticcells.ThisPTPhasbeenshowntointeractwith,anddephosphorylateawidespectrumofphospho-proteinsinvolvedinhematopoieticcellsignaling.Multiplealternativelysplicedvariantsofthisgene,whichencodedistinctisoforms,havebeenreported.[providedbyRefSeq,Jul2008]造血细胞磷酸酶抗体Alsoknownas:SHP1 70kdaSHP1Lprotein 70kdaSHP1Lprotein 70Z-SHP EC3.1.3.48 HCP HCPH Hematopoieticcellphosphatase Hematopoieticcellproteintyrosinephosphatase Hematopoieticcellprotein-tyrosinephosphatase HPTP1C HPTP1C MGC124580 Proteintyrosinephosphatase1C Proteintyrosinephosphatasenonreceptortype6 ProteintyrosinephosphataseSHP1 ProteintyrosinephosphataseSHP1 Protein-tyrosinephosphatase1C Protein-tyrosinephosphataseSHP-1 PTN6_HUMAN PTP1C PTP-1C PTP1C PTPN6 PTPN6 造血细胞磷酸酶抗体SHPTP1 SHPTP1 SH-PTP1 SHP1 SHP1L SHP1L SHPTP1 SHPTP1 Tyrosineproteinphosphatasenonreceptortype6 Tyrosine-proteinphosphatasenon-receptortype6.Specificity:●造血细胞磷酸酶抗体RabbitPolyclonalIgG,affinitypurifiedbyProteinA.●Reactswith:Human,Mouse,Rat,Cow,.●Immunogen:KLHconjugatedsyntheticpeptidederivedfromhumanSHP-1.●PredictedMolecularWeight:68kDa.Storage:Shippedat4℃,Storeat-20℃(Avoidrepeatedfreeze/thawcycles).Application:WB=1:100-500ELISA=1:500-1000IHC-P=1:100-500IHC-F=1:100-500IF=1:100-500Notyettestedinotherapplications.Optimalworkingdilutionsmustbedeterminedbytheenduser.kl098Rb51肌浆球蛋白(Myo)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoMyosin(Myo)kl218Ge01激素脱落酸(ABA)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoAbscisicAcid(ABA)kl907Ge01去甲肾上腺素(NE)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoNoradrenaline(NE)kl121Ge01阿片肽(OP)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoOpioidPeptide(OP)kl115Pl01多酚氧化酶(PPO)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoPolyphenolOxidase(PPO)kl960Hu01原卟啉原氧化酶(PPOX)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoProtoporphyrinogenOxidase(PPOX)kl960Mu01原卟啉原氧化酶(PPOX)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoProtoporphyrinogenOxidase(PPOX)kl960Ra01原卟啉原氧化酶(PPOX)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoProtoporphyrinogenOxidase(PPOX)kl726Bo01转甲状腺素蛋白(TTR)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoTransthyretin(TTR)kl459Ge01孕酮(PG)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoProgesterone(PG)kl820Bo01凝血因子Ⅱ(F2)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoCoagulationFactorII(F2)kl116Hu01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Mu01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Ra01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Gu01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Si01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Ca01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Po01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl116Bo01调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRegulatedOnActivationInNormalT-CellExpressedAndSecreted(RANTES)kl096Pl01核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(RuBisCO)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoRibulose-1,5-BisphosphateCarboxylase/Oxygenase(RuBisCO)kl099Ge01唾液酸(SA)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoSialicAcid(SA)kl592Hu01生长抑素(SST)多克隆抗体PolyclonalAntibodytoSomatostatin(SST)kl592Mu01
小鼠血细胞,WEHI-3细胞
小鼠血细胞,WEHI-3细胞原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养法有组织块培养和分散细胞培养。细胞株(CellStrain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株。细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞株是细胞系的真子集。小鼠血细胞,WEHI-3细胞实验操作步骤a.采用认可的方案处死啮齿动物。b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。细胞优点1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结小鼠血细胞,WEHI-3细胞构功能和生命活动。2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广。5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化。6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。小鼠血细胞,WEHI-3细胞本公司提供原代及传代细胞、复苏及冻存、悬浮及贴壁、国外及国内细胞,我们拥有多国品牌细胞库的细胞,有着多年的细胞培养经验,客户可信赖使用。开学大促销细胞名称:hz10819人卵巢癌细胞,TOV-112D细胞hz10820人卵巢癌细胞,SW626细胞hz10821人卵巢癌细胞,SK-OV-3细胞hz10822人卵巢癌细胞,OVTOKO细胞hz10823人卵巢癌细胞,OVISE细胞hz10824人卵巢癌细胞,OVCAR4细胞hz10825人卵巢癌细胞,OVCAR3细胞hz10826人卵巢癌细胞,Ovary细胞hz10827人卵巢癌细胞,OVAC细胞hz10828人卵巢癌细胞,OV90细胞hz10829人卵巢癌细胞,OV56细胞hz10830人卵巢癌细胞,KURAMOCHI细胞hz10831人卵巢癌细胞,KM202L细胞hz10832人卵巢癌细胞,IGROV1细胞hz10833人卵巢癌细胞,HOC1细胞hz10834人卵巢癌细胞,HO-8910细胞hz10835人卵巢癌细胞,EFO-27细胞hz10836人卵巢癌细胞,EFO-21细胞hz10837人卵巢癌细胞,COV644细胞hz10838人卵巢癌细胞,COV504细胞hz10839人卵巢癌细胞,COV434细胞hz10840人卵巢癌细胞,COV362细胞hz10841人卵巢癌细胞,COLO720E细胞hz10842人卵巢癌细胞,COLO-704细胞hz10843人卵巢癌细胞,COC1细胞hz10844人卵巢癌细胞,CaOV3细胞hz10845人卵巢癌细胞,A2780细胞hz10846人卵巢癌细胞,8910PM细胞hz10847
显示DNA、粘液和血细胞的组合法核酸染色试剂盒
名称规格价格显示DNA、粘液和血细胞的组合法核酸染色试剂盒100次1990运输:常温保存:常温有效期:1年货期:3-5天实验原理:抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。显示DNA、粘液和血细胞的组合法核酸染色试剂盒实验步骤:(一)脱蜡和水化:(二)抗原修复:(三)免疫组化染色SP法(四)SABC法免疫组化问题解答1、染色过强a抗体浓度过高戒孵育时间过长。降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时、或4度过夜b孵育温度过高超过37度。一般在室温20-28度cDAB显色时间过长戒浓度过高显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a操作过程中冲洗不充分:每步冲洗3次每次5分钟。b组织中含过氧化物酶未阻断:可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长。c组织中含内原性生物素:正常非免疫动物血清再封闭。d血清蛋白封闭不充分:延长血清蛋白封闭时间。3、染色弱a抗体浓度过低、孵育时间过短:提高抗体浓度、孵育时间不能少于60分钟。b试剂超过有效使用时间:应更换试剂。c操作中添加试剂时缓冲液未沥干:每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液使试剂稀释(应防止切片干燥)。d室温太低:低于15度,要改放在37度孵育箱孵育30-60分钟,或4度冰箱过夜。e蛋白封闭过度:封闭不要超过12分钟。4、染色阴性a操作步骤错误:应重试、设阳性对照。b组织中无抗原:设阳性对照以验证试验结果。c一抗不二抗种属连接错误:仔细确定一抗二抗种属无误。免疫组化技术的关键问题
血细胞活性氧检测试剂盒-绿色荧光
血细胞活性氧检测试剂盒-绿色荧光保存温度-20℃避光注意事项1.避免反复冻融。2.可以根据需要分装后冻存。3.探针为DMSO溶液,在2-8℃时是固体状态,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。有效期6个月检测方法1.荧光分光光度计2.荧光酶标仪适用样本血细胞产品特点1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测;2.背景低,灵敏度高;3.线性范围宽,使用方便。仪器准备1.荧光分光光度计或荧光酶标仪,2.离心机3.移液器4.冰箱5.冰盒试剂准备纯水或PBS缓冲液或者HBSS耗材准备1.离心管2.吸头3.一次性手套4.荧光专用黑色透明底96孔板使用注意事项1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。2.荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。3.探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底96孔细胞培养板。6.以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整或参考文献。特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
血细胞瘤细胞系
【产品名称】:血细胞瘤细胞系【供应商】:ATCC【产品库存】:现货血细胞瘤细胞系【详细介绍】:细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,R.I.(1987).CultureofAnimalCells.AManualofBasicTechnique.(NewYork,AlanR.Liss,Inc.)].这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。血细胞瘤细胞系【细胞冻存】:将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。血细胞瘤细胞系【其它供应新产品
小鼠血细胞
【产品名称】:小鼠血细胞【供应商】:ATCC【产品库存】:现货小鼠血细胞【详细介绍】:细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,R.I.(1987).CultureofAnimalCells.AManualofBasicTechnique.(NewYork,AlanR.Liss,Inc.)].这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。小鼠血细胞【细胞冻存】:将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。小鼠血细胞【其它供应新产品】:TC-hxbz-248人膀胱癌细胞BIU-87TC-hxbz-249人胆管癌细胞RBETC-hxbz-250人胆管癌细胞QBC939TC-hxbz-251人乳腺癌细胞MCF-7TC-hxbz-252人乳腺癌细胞MCF-7(NEW)TC-hxbz-253人乳腺癌细胞MCF-7(OLD)TC-hxbz-254人乳腺癌细胞MCF-7/ER36TC-hxbz-255人乳腺癌细胞(耐阿霉素)MCF-7/ADRTC-hxbz-256人乳腺癌细胞MCF-7BTC-hxbz-257
小鼠血细胞
小鼠血细胞操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,小鼠血细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!细胞传代培养(消化法)具体操作:一:传代前准备;1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。6.取出预热好的培养用液:小鼠血细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。二:胰蛋白酶消化;1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。2.小鼠血细胞显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。三:吹打分散细胞;1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。四:分装稀释细胞;1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。五:继续培养;用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。小鼠血细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。XY0920人胶质母细胞瘤细胞,A172细胞,XY0921人胶质母细胞瘤T98G细胞XY0922人胶质瘤细胞,U251细胞XY0923人胶质瘤细胞,TJ905细胞XY0924人胶质瘤细胞,SKMG4细胞,XY0925人胶质瘤细胞,SKMG1细胞XY0926人胶质瘤细胞,SHG-44细胞XY0927人间皮瘤细胞,NCI-H2452[H2452]细胞XY0928人甲状腺髓样癌细胞,TT细胞XY0929人甲状腺鳞癌细胞,SW579细胞,XY0930人甲状腺鳞癌细胞,SW579[SW579 SW-579]细胞XY0931人甲状腺磷癌细胞,SW579细胞XY0932人甲状腺导管瘤细胞,TT细胞XY0933人甲状腺癌细胞,SW579细胞XY0934人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)NB4细胞XY0935人急性淋巴细胞白血病细胞,CEM/C1细胞,XY0936人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞,CCRF-CEM细胞XY0937人急性淋巴母细胞白血病细胞,MT-4细胞XY0938人急性淋巴母细胞白血病细胞,MOLT-4细胞XY0939人急性非B非T淋巴细胞白血病Reh细胞XY0940人急性单核细胞白血病细胞,THP-1细胞XY0941人急性成髓细胞白血病Kasumi-1细胞XY0942人急性T细胞白血病Jurkat细胞,XY0943人急性T淋巴细胞白血病细胞,Jurkat细胞XY0944人急性T淋巴母细胞白血病细胞,MOLT-4细胞XY0945人回盲肠腺癌细胞,HCT-8细胞,XY0946人滑膜肉瘤细胞,SW982细胞,XY0947人喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞XY0948人喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞XY0949人喉癌细胞,TU212细胞XY0950人喉癌细胞,TU686细胞XY0951人喉癌细胞,M4e细胞XY0952
小鼠血细胞
我公司是国内最权威的细胞供应商,提供小鼠血细胞的报价,咨询,技术服务,欢迎来电咨询选购。细胞纯度:94%细胞活力:98%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)细胞运输:小鼠血细胞干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗验操作步骤:a.采用认可的方案处死啮齿动物。b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。实验材料:小鼠血细胞1.50ml配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml0.25%胰蛋白酶1瓶;PBS(-)1瓶2.100ml灭菌烧杯2个;3、50ml离心筒2个4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个5、1ml,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个6、细胞计数板1块;7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;8、酒精灯1台;小鼠血细胞更多相关细胞产品:XY0531人胃癌细胞,SNU-638细胞XY0532人胃癌细胞,SGC7901细胞XY0533人胃癌细胞,NUGC-3细胞XY0534人胃癌细胞,NCI-N87细胞XY0535人胃癌细胞,MKN-45细胞XY0536人胃癌细胞,MKN-28细胞XY0537人胃癌细胞,MGC80-3细胞,XY0538人胃癌细胞,Hs746T细胞XY0539人胃癌细胞,BSG823细胞XY0540人胃癌细胞,AZ-521细胞XY0541人胃癌细胞,9811C11细胞XY0542人胃癌顺铂耐药株SGC7901/DDP细胞XY0543人胃癌耐药顺铂细胞株SGC-7901/DDP细胞XY0544人未分化胃癌细胞,HGC-27细胞XY0545人微血管內皮細胞株HMEC-1细胞XY0546人外周血嗜碱性白血病细胞,KU812细胞XY0547人退行性癌细胞,Calu-6细胞XY0548人套细胞淋巴瘤细胞,JeKo-1细胞XY0549人胎盘绒膜癌细胞,BeWo细胞XY0550人胎盘绒毛癌细胞,JAR细胞XY0551人髓系白血病细胞系KGIa细胞XY0552人髓母细胞瘤细胞,D341Med细胞XY0553人输尿管上皮永生化细胞,SV-HUC-1细胞XY0554人视网膜神经胶质瘤细胞,WERI-Rb-1细胞XY0555人视网膜色素上皮细胞,D407细胞XY0556人视网膜色素上皮细胞,ARPE-19细胞XY0557人视网膜母细胞瘤Y79细胞XY0558人视网膜母细胞瘤Rb细胞XY0559人食管鳞癌细胞,KYSE-150细胞XY0560人食管鳞癌KYSE70细胞
血细胞瘤细胞系
血细胞瘤细胞系培养细胞的常规观察:细胞接种或传代以后,实验者每天或至多间隔1~2d,要对细胞做常规性检查。观察细胞形态和生长情况以及培养的pH变化、有无污染等。根据细胞动态变化,做换液或传代处理,如发现异常情况应及时采取措施。血细胞瘤细胞系检测原理:细胞发生凋亡或坏死,其细胞DNA均发生断裂,细胞内小分子量DNA片断增加,高分子DNA减少,胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间,出现180-200bpDNA片断,而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断,利用此特征可以确定群体细胞的死亡,并可与坏死细胞区别。血细胞瘤细胞系检测步骤:1.将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体2.在微定量板上吸附组蛋白体3.加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合4.加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合5.加酶的底物,测光吸收制血细胞瘤细胞系其他产品信息:大鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人辅肌动蛋白α4(ACTN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠囊泡谷氨酸转运蛋白1(VGLUT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人嘌呤能受体P2Y14(P2RY14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人Synerginγ蛋白(SYNRγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人G蛋白偶联受体109B(GPR109B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人Crk样蛋白(CRKL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠Crk样蛋白(CRKL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠白介素10受体α(IL10Rα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人Palmdelphin蛋白(PALMD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠游离脂肪酸受体2(FFAR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人PRMT5协同因子(COPR5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠VI型胶原(COL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠VI型胶原(COL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠VI型胶原(COL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠VI型胶原(COL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人组织蛋白酶A(CTSA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠转铁蛋白受体(TFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠多巴胺受体D4(DRD4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠多巴胺受体D2(DRD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠髓分化因子88(MyD88)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人白介素12受体β1(IL2Rβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人蛋白酪氨酸磷酸酶受体J(PTPRJ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人间隙连接蛋白37(CX37)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠VI型胶原(COL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠游离脂肪酸受体3(FFAR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
血细胞瘤细胞系Ramos细胞
培养血细胞瘤细胞系Ramos细胞操作1.器械和器皿器械:外科剪、镊子、虹膜剪等、小剪刀、细镊子和虹膜小刀等各种金属器械如解剖器械,使用后及时刷洗干净,血细胞瘤细胞系Ramos细胞用酒精棉球擦拭后晾干,或经60°C烘干,以防生锈。由于湿热消毒对手术器械容易可用70-80%酒精浸泡1小时以上消毒。器皿:1)玻璃瓶及相应的胶塞或胶木螺旋盖用于分装血清、多聚赖氨酸、解剖液、各种盐溶液和培养液等。2)用培养瓶、盖玻片培养用的盖玻片必须不含铅、不发霉,血细胞瘤细胞系Ramos细胞可用0.2N盐酸浸泡10分钟,用蒸馏水洗2次,每次10分钟,然后移入丙酮或乙醇浸泡10分钟,再用双蒸水洗2次,每次10分钟,烘干待消毒。凡组织学用过的旧盖玻片一般不用。3)移液管、吸管、烧杯、离心管和培养皿。4)塑料培养皿(35mm)、塑料培养板(6、24、96孔)。辅助工具:放置试管、吸管和玻璃瓶等的架子。细胞识别,根据细胞外形血细胞瘤细胞系Ramos细胞及内部结构进行细胞的识别。神经细胞具有显著的特征,培养中的贴壁的神经元突起很明显,特别是树突由粗而细,有分支,突起的末端有膨大的生长锥结构,正在不断变化;细胞体呈圆形、梭形、三角形或多角形不等,胞体较厚,具有空泡状核,有明显的核仁;立体感强,常见“晕”。培养细胞中可包括几种神经元的类型和非神经元的“背景细胞”,即成纤维细胞、室管膜细胞和几种胶质细胞。成纤维细胞贴壁最快,呈扁平状,胞核卵园形,有并列的两粒小核仁,从胞体两端发出细长突起。胶质细胞贴附在胶原上和成纤维细胞形成一层“地毯”。神经细胞贴壁较慢,落在“地毯”上生长迁移和分化。培养的神经细胞可按一般Nissl法染色或免疫细胞化学特异性染色加以鉴别。其他同类产品:HZA046Mu小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒ELISAKitforGlucoprotein130(gp130)HZA548Mu小鼠细胞间粘附分子1(ICAM1)ELISA试剂盒ELISAKitforIntercellularAdhesionMolecule1(ICAM1)CEA592Mu小鼠生长抑素(SST)ELISA试剂盒ELISAKitforSomatostatin(SST)CEA876Mu小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒ELISAKitforCalcitoninGeneRelatedPeptide(CGRP)HZA875Mu小鼠碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA试剂盒ELISAKitforCarbonicAnhydraseI(CA1)HZA469Mu小鼠内皮脂肪酶(LIPG)ELISA试剂盒ELISAKitforLipase,Endothelial(LIPG)HZA800Mu小鼠妊娠关联血浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒ELISAKitforPregnancyAssociatedPlasmaProteinA(PAPPA)HZA399Mu小鼠高迁移率族蛋白1(HMG1)ELISA试剂盒ELISAKitforHighMobilityGrou
血细胞蛋白提取试剂盒
血细胞蛋白提取试剂盒规格价格50T600元100T1000元储存条件:酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液室温保存。有效期:一年。产品简介:血细胞蛋白提取试剂盒适用于从各种哺乳动物全血细胞中提取总蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。本试剂盒中不含EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。本试剂盒提取的蛋白不可用于等点聚焦电泳、双向电泳。。产品特点:1、使用方便,将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。2、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。3、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
血细胞瘤细胞系Ramos细胞
我公司是国内最权威的细胞供应商,提供血细胞瘤细胞系Ramos细胞的报价,咨询,技术服务,欢迎来电咨询选购。细胞纯度:94%细胞活力:98%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)细胞运输:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗验操作步骤:血细胞瘤细胞系Ramos细胞a.采用认可的方案处死啮齿动物。b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。实验材料:血细胞瘤细胞系Ramos细胞1.50ml配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml0.25%胰蛋白酶1瓶;PBS(-)1瓶2.100ml灭菌烧杯2个;3、50ml离心筒2个4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个5、1ml,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个6、细胞计数板1块;7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;8、酒精灯1台;血细胞瘤细胞系Ramos细胞更多相关细胞产品:XY1417红白细胞白血病细胞,HEL299细胞XY1418横纹肌瘤细胞,A-673细胞XY1419恒河猴肾细胞,MA-104细胞XY1420恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞XY1421恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞XY1422恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞XY1423恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞XY1424黑色素瘤细胞,B16细胞XY1425黑曲霉XY1426褐鼠胰岛素瘤上皮细胞,RIN-m细胞,XY1427褐球固氮菌XY1428和元菌种与细胞XY1429汉逊德巴利酵母XY1430海枣曲霉XY1431哈茨木霉XY1432果子狸肾上皮细胞,Hed68细胞XY1433鲑鱼胚胎细胞,RTG细胞XY1434鲑鱼胚胎细胞,CHSE细胞XY1435光滑念珠菌XY1436光孢短柄帚霉XY1437骨髓瘤细胞株U266细胞,XY1438骨髓瘤细胞,SP2/0细胞XY1439骨髓瘤细胞,P3X63Ag8细胞XY1440骨髓瘤细胞,P3X63Ag8.653细胞XY1441骨髓瘤细胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞XY1442骨髓瘤细胞,FO细胞XY1443骨肉瘤细胞,U-2OS细胞XY1444骨肉瘤细胞,SW1353细胞XY1445骨肉瘤细胞,MG-63细胞XY1446谷氨酸棒杆菌XY1447构巢曲霉XY1448狗肾细胞隆突型MDCKsuperdome细胞XY1449狗肾细胞,SuperTube细胞XY1450狗肾细胞,MDCK细胞,
血细胞蛋白提取试剂盒
血细胞蛋白提取试剂盒动物蛋白提取试剂盒货号规格价格100T¥1000元50T¥600元产品概述储存条件:酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液室温保存。有效期:一年。产品简介:血细胞蛋白提取试剂盒适用于从各种哺乳动物全血细胞中提取总蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。本试剂盒中不含EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。本试剂盒提取的蛋白不可用于等点聚焦电泳、双向电泳。如下游实验需要用于双向电泳,请使用其他货号的试剂盒。产品特点:1、使用方便,将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。2、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。3、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
正常人肝细胞,L-02细胞
正常人肝细胞,L-02细胞原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养法有组织块培养和分散细胞培养。细胞株(CellStrain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株。细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞株是细胞系的真子集。正常人肝细胞,L-02细胞实验操作步骤a.采用认可的方案处死啮齿动物。b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。细胞优点1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结正常人肝细胞,L-02细胞构功能和生命活动。2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广。5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化。6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。正常人肝细胞,L-02细胞本公司提供原代及传代细胞、复苏及冻存、悬浮及贴壁、国外及国内细胞,我们拥有多国品牌细胞库的细胞,有着多年的细胞培养经验,客户可信赖使用。开学大促销细胞名称:hz10117小鼠胰腺腺泡细胞癌细胞,MPC-83细胞hz10118小鼠胰腺癌细胞,LTPA细胞hz10119小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞,Beta-TC-6细胞,hz10120小鼠胰岛素瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠,SV40巨T抗原)NIT-1细胞hz10121小鼠胰岛素瘤β细胞,NIT-1β细胞,hz10122小鼠胰岛内皮细胞,MS1细胞,hz10123小鼠胰岛β细胞株Min6细胞hz10124小鼠血细胞,WEHI-3细胞hz10125小鼠血管瘤内皮细胞,EOMA细胞,hz10126小鼠小胶质细胞,BV2细胞hz10127小鼠胃癌细胞,MFC细胞,hz10128小鼠网织细胞肉瘤M5076细胞hz10129小鼠饲养层上皮细胞,HPT-8细胞hz10130小鼠树突状细胞肉瘤细胞,DCS细胞hz10131小鼠树突状细胞,DC2.4细胞,hz10132小鼠视网膜神经节细胞株细胞,RGC-5细胞hz10133小鼠肾足细胞,Mousepodocyte细胞hz10134小鼠肾小球系膜细胞,SV40MES13细胞,hz10135小鼠肾小球系膜细胞,MES-13细胞hz10136小鼠肾腺癌细胞,RAG细胞,hz10137小鼠肾系膜细胞,MC53细胞hz10138小鼠肾上腺皮质瘤细胞,Y1细胞,hz10139小鼠肾集合管细胞(SV40转化)M-1细胞hz10140小鼠肾癌细胞株RuCa细胞hz10141小鼠肾癌细胞,Kert-3细胞hz10142小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞,NG108-15[108CC15]细胞hz10143
造血细胞激酶抗体
造血细胞激酶抗体产品类别兔抗人、大、小鼠Hck抗体造血细胞激酶抗体产品标准浓缩液(1mg/1ml)亲和纯化抗体产品应用WB=1:100-500Elisa=1:200-1000IP=1:20-100IHC=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)造血细胞激酶抗体产品介绍激酶和磷酸酶(KinasesandPhosphatases)xy-1039xyTenascin固生蛋白抗原xy-2101xyTEM1/CD248(Tumorendothelialmarker1precursor)内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗原xy-0535xyTFF3(trefoilfactor3)三叶肽因子3(多肽)xy-1144xyTFPI-2(tissuefactorpathwayinhibitor-2)组织因子途径抑制剂-2抗原xy-1838xyTIEG1/KLF10(TGF-betainducibleearlyresponsegene1)TGF-β诱导早期应答基因1抗原xy-0638xyTGF-BetaR1/ALK(TGF-betareceptortypeI)转移生长因子–β受体1抗原xy-1276xyErdj5/DNAJC10Erdj5/DNAJC10多肽xy-1334xyTie1/JTK14peptide上皮生长因子样域酪氨酸激酶1抗原xy-1300xyTie2(Porcinetyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2)上皮生长因子样域酪氨酸激酶2抗原xy-1501xyRarres2/TIG2/Chemerin(Retinoicacidreceptorresponderprotein2)视黄酸受体应答蛋白2抗原造血细胞激酶抗体xy-1444xyTLR3(Toll-likereceptor3)Toll样受体3抗原xy-1021xyTLR4/CD284(Toll-likereceptor4)Toll样受体4抗原xy-1197xyTLR5/CD285(Toll-likereceptor5)Toll样受体5抗原xy-0525xyTM(Thrombomodulin)血栓调节蛋白多肽xy-1327xyTn-C(Tenascin-C)C-Terminus腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原xy-2081xyTNF-alpha肿瘤坏死因子-α抗原xy-0093xyTNF-Beta(TumorNecrosisFactor-Beta)肿瘤坏死因子-β抗原xy-2104xyTNFAIP1(Tumornecrosisfactor-alpha-inducedprotein1)肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗原xy-1203xyTOPOIIAlpha/DNATPIIAlpha(DNAtopoisomeraseIIAlpha)DNA拓普西异构酶Ⅱ抗原xy-0329xyTRA16(Testicularorphannuclearreceptor-4(TR4)-associatedprotein)睾丸激素受体相关蛋白/孤儿素受体相关蛋白(抗原)xy-1202xyTRADD(TNFreceptor1associatedviadeathdomain)有死亡区的肿瘤坏死因子受体1相关蛋白抗原xy-1212xyTRAF1肿瘤坏死因子受体相关因子1抗原xy-1213xyTRAF2/TNF-R2(TNFreceptor-associatedfactor2)肿瘤坏死因子受体相关因子2抗原xy-1185xyTRAF3/CD40bp(CD40bindingprotein)肿瘤坏死因子受体相关蛋白3抗原xy-1184xyTRAF6(TNFreceptor-associatedfactor6)肿瘤坏死因子受体相关因子6抗原xy-1214xyTRAIL/Apo2L(tumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗原xy-1151xyTRBF1(Telomericrepeatbindingfactor1)端粒体复制结合因子1抗原xy-0964xyTRIM32(tripartitemotifprotein32)TRIM32抗原xy-1243xyTrop-2/Tpm2peptide原肌球蛋白抗原xy-1220xyTSARG4(Testisandspermatogenesisrelatedgene4)生精细胞凋亡相关基因4抗原xy-0716xyCIDEBpeptideCIDEB抗原
造血细胞磷酸酶抗体
造血细胞磷酸酶抗体产品标准浓缩液(1mg/1ml)亲和纯化抗体造血细胞磷酸酶抗体产品应用WB=1:100-500Elisa=1:200-1000IP=1:20-100IHC=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)造血细胞磷酸酶抗体产品介绍蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)能是一个潜在的抑癌基因,它负性调节c-kit基因而抑制肿瘤的发生 SHP-1为含SH2域(srchomology-2domain)的酪氨酸磷酸酶-1,主要表达于造血细胞,因此又称为造血细胞磷酸酶(hematopoieticcellphosphatase,HCP,也称为SHP-1或SHPTP1)。xy-4585RGRPP肠高血糖素相关肽抗体xy-8596RGPR120G蛋白偶联受体120抗体xy-9564RGPR40G蛋白偶联受体40抗体造血细胞磷酸酶抗体xy-11402RGCX1/C20orf10020号染色体开放阅读框100抗体xy-11403RGNRHR2促性腺素释放激素受体2抗体xy-11404RGPR106G蛋白偶联受体106抗体xy-8656RG1switch2G0/G1期开关调节蛋白2抗体xy-15386RGPR162G蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体xy-11406RGIOT1锌指蛋白461抗体xy-6880RGPR109AG蛋白偶联受体109A抗体xy-13367RGKAP1G激酶锚定蛋白1抗体xy-13361RGIYD2DNA修复蛋白GIYD2抗体xy-6384RGIDRP88生长抑制和分化相关蛋白抗体xy-6383RGANP生发中心相关核蛋白MCM3抗体xy-4974RGlucose6PhosphateDehydrogenase葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体xy-11921RGATAD1眼发育相关基因蛋白ODAG抗体xy-4725RGCDFP15特异性囊肿病液体蛋白15xy-4726RGCDFP15特异性囊肿病液体蛋白15xy-11794RGHRHR生长激素释放因子受体抗体xy-12026RGPR115G蛋白偶联受体115抗体xy-11803RGPR10G蛋白偶联受体10抗体xy-11779RGBAβ-葡萄糖脑苷脂酶抗体xy-8412RGrpa半乳糖凝集素相关蛋白A抗体xy-8413RGalectin12半乳糖凝集素12抗体xy-13260RGABATransporter3γ氨基丁酸运载蛋白3抗体xy-8267RGIMAP1GTP酶IMAP家族成员1抗体xy-8268RGIMAP2GTP酶IMAP家族成员2抗体xy-8269RGIMAP3GTP酶IMAP家族成员3抗体xy-8270RGIMAP4GTP酶IMAP家族成员4抗体xy-8271RGIMAP5GTP酶IMAP家族成员5抗体xy-8276RGPRIN2G蛋白调节诱导神经突增生蛋白2抗体xy-8273RGIMAP7GTP酶IMAP家族成员7抗体xy-8274RGIMAP8GTP酶IMAP家族成员8抗体xy-8275RGPRIN1G蛋白调节诱导神经突增生蛋白1抗体xy-8277RGPRIN3G蛋白调节诱导神经突增生蛋白3抗体xy-6429RGNLY颗粒溶素抗体xy-8272RGIMAP6GTP酶IMAP家族成员6抗体xy-7759RGGCXγ-谷氨酰羧化酶抗体xy-9554RGTPBP9鸟嘌呤核苷酸结合蛋白9抗体xy-13458RGMIPGEM相互作用蛋白抗体xy-8581RGSTCD谷胱甘肽硫转移酶C段结构域抗体xy-8582RGTDC1糖基转移酶样1抗体xy-9205RGDE3促进成骨细胞分化因子抗体xy-9206RGDPD3甘油磷酸二酯酶磷酸结构域3抗体xy-13346RGGCTγ-谷氨酰基环转移酶抗体xy-1288GGDF8生长分化因子8/肌肉抑制素抗体xy-4499RVP3Gooseparvovirus鹅细小病毒GPV抗体
造血细胞激酶抗体
造血细胞激酶抗体产品编号LM1438R英文名称Hck中文名称造血细胞激酶抗体别名Bmk Hck1 Hemopoieticcellkinase Hemopoieticcellkinaseisoformp59Hck JTK9 JTK9 MGC18625 MGC18625 p59HCK/p60HCK p59HCK/p60HCK TyrosineproteinkinaseHCK HCK_HUMAN.研究领域免疫学生长因子和激素激酶和磷酸酶抗体来源Rabbit克隆类型Polyclonal交叉反应Human,Mouse,Rat,Chicken,Cow,Horse,Rabbit,Sheep,产品应用WB=1:500-2000ELISA=1:500-1000IHC-P=1:400-800IHC-F=1:400-800ICC=1:100-500IF=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)notyettestedinotherapplications.optimaldilutions/concentrationsshouldbedeterminedbytheenduser.分子量58kDa细胞定位细胞核细胞浆细胞膜性状LyophilizedorLiquid浓度1mg/ml免疫原KLHconjugatedsyntheticpeptidederivedfromhumanHck:301-450/526亚型IgG纯化方法affinitypurifiedbyProteinA储存液0.01MTBS(pH7.4)with1%BSA,0.03%Proclin300and50%Glycerol.保存条件Storeat-20°Cforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20°C.WhenreconstitutedinsterilepH7.40.01MPBSordiluentofantibodytheantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.PubMedPubMed产品介绍HCKisatyrosinekinasethatispredominantlyexpressedinhemopoieticcelltypes.ItmayhelpcoupletheFcreceptortotheactivationoftherespiratoryburst.Inaddition,itmayplayaroleinneutrophilmigrationandinthedegranulationofneutrophils.抗原与抗体的关系①抗体和相应的抗原结合后,可以促进白细胞的吞噬作用而将抗原消除,使抗原失去致病作用。②一种抗体只能抵抗一种抗原,而且一种抗体只能受相应的抗原刺激后才能形成。免疫的功能:免疫具有三方面的功能:①防御功能:抵抗抗原的侵入、防止疾病的产生。②自我稳定:清除体内衰老、死亡和损伤的细胞。③免疫监视:监视、识别和清除体内产生的异常细胞。特别提醒:过敏反应:当人体抵抗抗原侵入的功能过强时,在过敏原(引起过敏反应的物质,如某些食物、药物)的刺激下,人体就会发生过敏反应。1.抗体名称容易出错抗体一般以抗原来命名,名称核对时最简单也最容易犯错,有些蛋白质有不同亚基(HIF-1α、HIF-1β);有些蛋白质有不同磷酸化状态,例如EGFR和p-EGFR的区别,等等。除了蛋白质的名称外,有其他后缀。2.多抗和单抗不同单抗上面介绍过了,而多抗(polyclonalantibodies)一般用兔子、山羊等大型动物,因为多抗是直接从血液中纯化提取出来的,而不像单抗是用细胞培养出来的。单克隆抗体的优点是产量持续稳定、特异性较高、但灵敏度不如多抗。如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多(WB/IP/IF/ICC等),可以选择单克隆抗体。多抗的特异性较差,存在批间差(因为兔子的血被放光挂掉了,而山羊可以常年养着,放点血出来,在养几天再放血,好残忍),易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深等等。但由于多抗识别多个抗原表位,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。
小鼠血细胞WEHI-3细胞
培养小鼠血细胞WEHI-3细胞操作1.器械和器皿器械:外科剪、镊子、虹膜剪等、小剪刀、细镊子和虹膜小刀等各种金属器械如解剖器械,使用后及时刷洗干净,小鼠血细胞WEHI-3细胞用酒精棉球擦拭后晾干,或经60°C烘干,以防生锈。由于湿热消毒对手术器械容易可用70-80%酒精浸泡1小时以上消毒。器皿:1)玻璃瓶及相应的胶塞或胶木螺旋盖用于分装血清、多聚赖氨酸、解剖液、各种盐溶液和培养液等。2)用培养瓶、盖玻片培养用的盖玻片必须不含铅、不发霉,可小鼠血细胞WEHI-3细胞用0.2N盐酸浸泡10分钟,用蒸馏水洗2次,每次10分钟,然后移入丙酮或乙醇浸泡10分钟,再用双蒸水洗2次,每次10分钟,烘干待消毒。凡组织学用过的旧盖玻片一般不用。3)移液管、吸管、烧杯、离心管和培养皿。4)塑料培养皿(35mm)、塑料培养板(6、24、96孔)。辅助工具:放置试管、吸管和玻璃瓶等的架子。细胞识别,根据细胞外形及内部结构进行细胞的识别。小鼠血细胞WEHI-3细胞神经细胞具有显著的特征,培养中的贴壁的神经元突起很明显,特别是树突由粗而细,有分支,突起的末端有膨大的生长锥结构,正在不断变化;细胞体呈圆形、梭形、三角形或多角形不等,胞体较厚,具有空泡状核,有明显的核仁;立体感强,常见“晕”。培养细胞中可包括几种神经元的类型和非神经元的“背景细胞”,即成纤维细胞、室管膜细胞和几种胶质细胞。成纤维细胞贴壁最快,呈扁平状,胞核卵园形,有并列的两粒小核仁,从胞体两端发出细长突起。胶质细胞贴附在胶原上和成纤维细胞形成一层“地毯”。神经细胞贴壁较慢,落在“地毯”上生长迁移和分化。培养的神经细胞可按一般Nissl法染色或免疫细胞化学特异性染色加以鉴别。其他同类产品:HZF292Mu小鼠封闭蛋白2(CLDN2)ELISA试剂盒ELISAKitforClaudin2(CLDN2)HZD089Mu小鼠溶酶体酸性磷酸酶2(ACP2)ELISA试剂盒ELISAKitforAcidPhosphatase2,Lysosomal(ACP2)HZB280Mu小鼠组织蛋白酶D(CTSD)ELISA试剂盒ELISAKitforCathepsinD(CTSD)HZB120Mu小鼠精氨酸酶(Arg)ELISA试剂盒ELISAKitforArginase(Arg)HZB498Mu小鼠蛋白二硫化物异构酶A2(PDIA2)ELISA试剂盒ELISAKitforProteinDisulfideIsomeraseA2(PDIA2)HZM546Mu小鼠Lin-28同源物A(LIN28A)ELISA试剂盒ELISAKitforLin-28HomologA(LIN28A)HZB884Mu小鼠受磷蛋白(PLN)ELISA试剂盒ELISAKitforPhospholamban(PLN)HZE676Mu小鼠再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA试剂盒ELISAKitforRegeneratingIsletDerivedProtein3Gamma(REG3g)
快速血细胞染液检测试剂盒
快速血细胞染液检测试剂盒原理采用间接竞争ELISA方法检测猪尿、组织、饲料中的沙丁胺醇,在微孔条上预包被上偶联抗原,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的,样本中的沙丁胺醇和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗沙丁胺醇抗体,再加入酶标二抗,用TMB底物显色,样品中的沙丁胺醇含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出沙丁胺醇含量。快速血细胞染液检测试剂盒酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒1.将试剂盒从冷藏环境中取出并将所需试剂从试剂盒取出,置室温(20-25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。2.按需要取出微孔条及板架,将不用的微孔板重新密封,保存于2-8℃,不要冷冻。3.加标准品/样本50μL/孔,然后加入抗体工作液50μL/孔,再振荡混匀,用封板膜盖板,37℃反应30min。4.洗板4-5次,每次浸泡30秒,拍干。5.加入酶标记物100μL/孔,用封板膜盖板,37℃反应20min。6.洗板4-5次,每次浸泡30s,拍干。7.显色:每孔加入底物缓冲液50μL,再加底物液50μL,轻轻振荡混匀,37℃环境避光显色10min。8.测定:每孔加入终止液50μL,轻轻振荡匀,设定酶标仪于450nm处(在20min内读完数据),测定吸光度值。快速血细胞染液检测试剂盒安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。8.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。11.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。12.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。快速血细胞染液检测试剂盒公司其它相关产品目录:xy-E11238人唾液酸(SA)ELISA试剂盒xy-E11239人鞘磷脂(SM)ELISA试剂盒xy-E11240人尿游离皮质醇(UFC)ELISA试剂盒xy-E11241人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒xy-E11242人硫酸皮肤素(DS)ELISA试剂盒xy-E11243人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒xy-E11244人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒xy-E11245人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒xy-E11246人迟现抗原4(VLA4)ELISA试剂盒xy-E11247人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒xy-E11248人甲胺喋呤(MTX)ELISA试剂盒xy-E11249人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒xy-E11250人苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒xy-E11251人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒xy-E11252人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒xy-E11253
快速血细胞染液
快速血细胞染液检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤快速血细胞染液用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。快速血细胞染液需要提供的试剂和器材37℃恒温箱标准规格酶标仪精密移液器及一次性吸头蒸馏水一次性试管吸水纸快速血细胞染液按试剂组成分类一、单试剂①优点:操作简便适用于各类生化分析,节约试剂位。②缺点:配方复杂(稳定剂),稳定性,不能完全避免内外源物质干扰。二、双试剂①优点:可较彻底排除样品空白和内外源干扰物,试剂稳定,便于储存,运输和使用,可用抑制法直接测定某些同工酶。②缺点:多占试剂位。更多产品引荐:xy-E13032鸡白痢抗体检测(PD)ELISA试剂盒ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA试剂盒96T/48Txy-E13033鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA试剂盒ChikenPullorumDiseaes,PDELISA试剂盒96T/48Txy-E13034鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISA试剂盒96T/48Txy-E13035鸡白介素18(IL-18)ELISA试剂盒ChickenInterferonα,IFN-αELISA试剂盒96T/48Txy-E13036鸡白介素1(IL-1)ELISA试剂盒ChickenInterleukin18,IL-18ELISA试剂盒96T/48Txy-E13037鸡病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA试剂盒ChickenInterleukin1,IL-1ELISA试剂盒96T/48Txy-E13038鸡肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒Chickenvirusenteritis,DEVELISA试剂盒96T/48Txy-E13039鸡白介素9(IL-9)ELISA试剂盒ChickenMyoglobin,MYO/MBELISA试剂盒96T/48Txy-E13040鸡白介素3(IL-3)ELISA试剂盒ChickenInterleukin9,IL-9ELISA试剂盒96T/48Txy-E13041鸡白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒ChickenInterleukin3,IL-3ELISA试剂盒96T/48Txy-E13042鸡转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISA试剂盒96T/48Txy-E13043鸡C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒ChickenTransformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒96T/48Txy-E13044鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒ChickenC-ReactiveProtein,CRPELISA试剂盒96T/48Txy-E13045鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒ChickenVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISA试剂盒96T/48Txy-E13046鸡碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒ChickenImmunoglobulinG,IgGELISA试剂盒96T/48Txy-E13047鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒Chickenbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA试剂盒96T/48Txy-E13048鸡可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒ChickenSolubleIntercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA试剂盒96T/48Txy-E13049鸡表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒ChickensolubleE-selectin,sE-selectinELISA试剂盒96T/48Txy-E13050鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISA试剂盒96T/48Txy-E13051鸡生长激素(GH)ELISA试剂盒ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA试剂盒96T/48Txy-E13052鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒Chickengrowthhormone,GHELISA试剂盒96T/48Txy-E13053鸡传染性鼻炎抗体(IC)ELISA试剂盒ChickenAcetoaceticacid,ACACELISA试剂盒96T/48Txy-E13054鸡透明质酸(HA)ELISA试剂盒Chickeninfectiouscoryza,icELISA试剂盒96T/48Txy-E13055鸡硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒ChickenHyaluronicacid,HAELISA试剂盒96T/48Txy-E13056鸡催乳素(PRL)ELISA试剂盒Chickenheparansulfate,HSELISA试剂盒96T/48T
造血细胞磷酸酶抗体
产品名称:造血细胞磷酸酶抗体产品用途:科研实验浓度:1mg/1ml贮存:贮存于-20℃.亚型:IgG性状:LyophilizedorLiquid产品类型:一抗造血细胞磷酸酶抗体的结构抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链);2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。抗体(Antibody),又称免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称Ig),是一种由B细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面造血细胞磷酸酶抗体作用(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。造血细胞磷酸酶抗体更多产品引荐:兔神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforEnolase,NeuronSpecific(NSE)Oryctolaguscuniculus(Rabbit)人皮质醇结合球蛋白(CBG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforCorticosteroidBindingGlobulin(CBG)Homosapiens(Human)大鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员12(TNFSF12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforTumorNecrosisFactorLigandSuperfamily,Member12(TNFSF12)Rattusnorvegicus(Rat)狗补体3a(C3a)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforComplementComponent3a(C3a)Canisfamiliaris Canine(Dog)人膜联蛋白A6(ANXA6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforAnnexinA6(ANXA6)Homosapiens(Human)人跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforTransmembraneProtease,Serine2(TMPRSS2)Homosapiens(Human)人畸胎瘤衍生生长因子1(TDGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforTeratocarcinomaDerivedGrowthFactor1(TDGF1)Homosapiens(Human)人Ⅹ型胶原(COL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforCollagenTypeX(COL10)Homosapiens(Human)人拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforTopoisomeraseI(TOP1)Homosapiens(Human)人叶酸受体1(FOLR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforFolateReceptor1,Adult(FOLR1)Homosapiens(Human)兔聚集蛋白聚糖(AGC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforAggrecan(AGC)Oryctolaguscuniculus(Rabbit)小鼠B-细胞激活因子(BAFF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforB-CellActivatingFactor(BAFF)Musmusculus(Mouse)人细胞间粘附分子4(ICAM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforIntercellularAdhesionMolecule4(ICAM4)Homosapiens(Human)小鼠阻抑素(PHB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforProhibitin(PHB)Musmusculus(Mouse)大鼠层粘连蛋白(LN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforLaminin(LN)Rattusnorvegicus(Rat)人平足蛋白(PDPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforPodoplanin(PDPN)Homosapiens(Human)人前梯度蛋白2(AGR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)ELISAKitforAnteriorGradientProtein2(AGR2)Homosapiens(Human)
造血细胞磷酸酶抗体
造血细胞磷酸酶抗体产品标准浓缩液(1mg/1ml)亲和纯化抗体产品应用WB=1:100-500Elisa=1:200-1000IP=1:20-100IHC=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)造血细胞磷酸酶抗体产品介绍蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)能是一个潜在的抑癌基因,它负性调节c-kit基因而抑制肿瘤的发生 SHP-1为含SH2域(srchomology-2domain)的酪氨酸磷酸酶-1,主要表达于造血细胞,因此又称为造血细胞磷酸酶(hematopoieticcellphosphatase,HCP,也称为SHP-1或SHPTP1)。造血细胞磷酸酶抗体hz-4157RPRKD3蛋白激酶Cnu型抗体hz-5564Rphospho-PRKD3(Ser41)磷酸化蛋白激酶Cnu型抗体hz-8717RSLC30A3/ZNT3溶质载体锌转运3抗体hz-8718RViperin/RSAD2病毒抑制蛋白Viperin抗体hz-1631RAnnexinⅢ膜粘连蛋白A3抗体hz-1564RAnnexinIV膜粘连蛋白A4抗体hz-8726RBZW2BZW2蛋白抗体hz-8729RTPH25色氨酸羟化酶2抗体hz-0398RAnnexinV膜粘连蛋白5抗体hz-5916RAnnexinA9膜粘连蛋白9抗体hz-5127RAnnexinA10/14膜粘连蛋白10抗体hz-1471RAnnexinVI膜粘连蛋白6抗体hz-5917RAnnexinA7膜粘连蛋白7抗体hz-4161RPRKCQ/PKCtheta蛋白激酶Ctheta抗体hz-5583Rphospho-PRKCQ(Ser676)磷酸化蛋白激酶Ctheta抗体hz-5584Rphospho-PRKCQ(Ser695)磷酸化蛋白激酶Ctheta抗体hz-5585Rphospho-PRKCQ(Thr538)磷酸化蛋白激酶Ctheta抗体hz-0450RAnnexinV重组膜粘连蛋白5抗体hz-4166RYES1原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体hz-5591Rphospho-YES1(Tyr426)磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体hz-5592Rphospho-YES1(Tyr537)磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体hz-0934RAnthrax炭疽杆菌抗体hz-0935RAnthrax炭疽菌抗体(采用活疫苗制备)hz-9001RSARM1SARM1蛋白抗体hz-9002RSAMD9SAMD9蛋白抗体hz-9003RSAMD7SAMD7蛋白抗体hz-9004RSAMD3SAMD3蛋白抗体hz-9005RCECR1/ADGF猫眼综合征染色体候选基因1抗体hz-9006RCECR6猫眼综合征染色体候选基因6抗体hz-9007RRCBTB1/CLLD7鸟嘌呤核苷酸交换因子抗体hz-9008RCLRN3/TMhz12跨膜蛋白12抗体hz-9009RTransportin1转运蛋白1抗体hz-9010RDPP6二肽基肽酶6抗体hz-9011REFHA1EFHA1蛋白抗体hz-9012RSENP1小泛素相关修饰蛋白1抗体
血细胞标准物质
BW2704血细胞标准物质2mL/瓶
血细胞标准物质
BW2703血细胞标准物质2mL/瓶
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一、固定时间法(取样法)前面已经提到,早期临床实验室测酶活性时常使用比色法,先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进行化学反应呈色测出底物和产物的变化。由于比色法灵敏度较低,或由于手工操作不易控制好,常定在30分钟左右。历史上这类方法常被命名为“终点法”、“二点法”、“固定时间法”和“取样法”。大多数文献使用“固定时间法”。此命名指出了用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。但“取样法”的命名更具有特征性。因它指出此类方法和下面将提到的另一类连续监测法相比较,最基本一点的是此类方法停止反应后才测底物或物的变化。很难进行连续监测,而另一类方法则不需停止酶反应,就可测定反应物的变化,很容易观察到反应的整个过程。后一类方法开始于50年代,Warburg首先用分光光度计。在340nm处直接监测到反应物NADH的动态变化过程。由于不停止酶反应,不需添加其它呈色试剂。测定方法简单,结果准确,逐步取代了“取样法”成为目前测酶活性的主要方法。由于经历了一个发展过程,命名比较混乱而且大部分不甚确切,IFCC建议命名为“连续监测法”,不用目前广为流行的“动态法”术语。其原因是目前测酶活性浓度方法都是基于化学反应。图17-6是一个典型的化学反应过程。图17-6 动态和平衡概念的示意图可以看出整个反应过程,可以大致分为二个时期。一开始为动态期,化学反应按一定速度进行,反应物浓度随时间而变化,且变化程度不断变小,到一定时间。化学反应或者达到平衡,或者反应达到终点,此时反应速度为零,反应物浓度不变。最近IFCC文件按所用方法所测定的反应是在达到平衡前还是平衡后。分别命名为动态法或平衡法。一般文献往往将后一类方法称为终点法。二、连续监测法与反应进程的分析从这个权威性的方法分类来看,前面所提到的二类测酶活性浓度方法都应归纳为动态法。目前广为流行的“动态法”命名显然是不确切的或者是不合适的。应该更多采用IFCC文件中建议的“连续监测法”命名。从酶反应曲线来比较此二类方法。图17-7是一个典型酶反应过程。图17-7 酶促反应中基质[S]、产物[P]和反应速率V在不同时间变化的模式图在酶作用下,底物[S]浓度不断下降,随之有相应产物[P]产生。不少酶在反应一开始的阶段,由于各种因素影响,反应速度较慢,称为延滞期,随后在过量浓度的底物存在条件下,酶反应以恒定的速度进行,不受底物浓度变化的影响,这段反应称为线性反应期或零级反应期。随时间延长,反应速度除与酶量有关,还与底物浓度有关。即v=k(a-x),式中a为原来底物浓度,x为消耗的底物浓度,如反应物浓度项上指数为1,称为一级反应,假如反应速率受二种或二种以上物质浓度的影响,则各个反应物浓度项上指数总和作为反应级数,可以分别为一级、二级或多级反应,总的将这段反应时期称为非线性反应期。很明显如测反应速度的目的是为了从此推算出酶含量的多少,则只有测线性反应期的反应速度才能作到此点。在延滞期、非线性期测的结果不准确,一般是偏低的。取样法由于方法学上的限制,一般只测二管:一为没发生酶反应的对照管,另一管测酶作用一段时间后反应物的变化,实际上测得是平均速度,而且二管间隔时间都较长,在半小时左右,图17-8中t,t分别代表不同时间二管反应物的量,虽然从t到t反应物变化量是相同的。但实际反应过程是多种多样的。只有当反应如曲线A时,用“固定时间法”才能测出真实的酶活性,实际工作中是很少见的,图中曲线B代表了最常见的反应情况,在一个很短的线性反应期后在大部分测定期间内主要为非线性反应期。曲线C说明在测定期间包括了延滞期,曲线D则不仅包括了延滞期,还包括非线性期,在这些反应中如用固定时间法来测定,结果是不够准确的,一般是偏低的,而且酶浓度愈高,偏离程度愈大。假如从上节叙述中得出一个重要结论:即在设计和选择测定酶活性浓度方法时必须是在“最适条件”下测定最大反应速度。那么从这段叙述中可得出一个对上述结论一个很重要的补充,即所测的最大反应速度还应该是初速度即V。理论上的V在实际工作中是不存在的,必须让酶和底物作用一段时间,消耗掉一定量的底物,才能测出反应速度,一般说,如消耗底物在5%内所测到的反应速度都可认为是初速度,如底物浓度很高时,底物消耗在20%以内的反应往往还在线性反应期。连续监测法能满足上述重要要求。由于不需停止酶反应。很容易得到整个酶反应曲线,然后根据反应曲线情况,避开延滞期和非线性反应期,只在线性反应期测定最大反应初速度。同时由于分光光度法的高灵敏度,自动生化分析仪的高精密度,连续监测法能在很短时间,甚至在1分钟反应时间,准确测定反应速度,从而求出准确的酶活性浓度。“固定时间法”测定时间长达30分钟,很难满足上述方法学上测定初速度V的要求。图17-8 二点测定法中可能引起的误差从理论上说,只有当测定的是初速度,米氏方程式才能成立,并可能测出真正的Km。用“固定时间法”测出的速度受到逆反应速度的影响。可以下式表示有逆向反应存在时的酶反应过程。k1 k2k3E+S→ES→EP→E+P← ← ←K-1k-2k-3存在着EP和P时,就会出现逆反应,此时所测的为一表观速度(Va)或反应的净速度。Va=k2[ES]-k-2[EP][E]t代表酶总量,在反应过程中包含了游离酶[E]、酶底物复合物[ES]和酶产物复合物[]EP]。Ks为[ES]的解离常数,Kp为[EP]的解离常数,故:代入上式得:根据Maldanc公式Keq=VfKp/VrKs得:在反应特定时间,产物[P]为一定值,上式得:此公式从理论上说明,如所测反应有逆反应存在时,不存在原来的米-门方程式。用各种作图法很难求出准确的米氏常数。如果说所测酶反应不仅存在着逆反应,产物还抑制了酶反应,则动力学公式将更为复杂。这就是为什么不仅在建立方法时,就是在研究酶的动力学时,也总是希望所测量的都是酶反应的初速度。以上这二类方法并不是概括了所有测酶活性浓度的方法,也并不排除在非线性反应期测酶活性浓度的可能性。如固定底物变化量,则不同标本达到此变化终点的时间,与酶量成反比例,Somogyi曾提出一种测淀粉酶的方法,酶与底物混合后。每隔半分钟取一滴出来加入碘液呈色,观察颜色由紫色变为红色时间,也就是淀粉酶全部水介变为糊精的时间,并由此时间的长短计算出酶含量高低,这类方法不需使用很高浓度的底物,有其独特之外,在自动生化分析仪中也曾使用类似的方法,值得人们重视。三、连续监测法测酶活性浓度连续监测法具有众多的优点,随着科学技术的发展,自动生化仪的使用,正在逐步取代“固定时间法”,发达国家从50年代到70年代末用了约20余年的时间,我国从80年代初开始使用连续监测法,虽然发展很快,但至少仍有不少地区医院实验室仍使用老的方法,就是已使用新法的实验室,也不一定掌握得很好,本节将比较详细地从分类,酶偶联反应,测定注意事项等方面对连续监测法加以介绍。(一)连续监测法种类⒈直接连续监测法这类方法是使用各种分析手段,如分光亮度法、荧光法、pH计、旋光计、电导仪等等,在不停止酶反应条件下直接测反应体系中底物或产物的变化,从而计算出酶活性浓度,其中尤以分光光度法应用最多,应用最广的有NAD(P)H反应系统,可以测定大部分的脱氢酶,还有的是所谓“色素原”底物,其本身为无色或微黄色,在酶作用下生成有色化合物,适用于测定水解酶和一些转移酶。⒉间接连续监测法直接法试剂简单,操作方便,可惜的是只有当底物与产物之间,在光学性质或其它理化性质有显著差异时,才有可能使用此法。到目前为止,大部分酶都无法用直接法测定。科学家还曾设法在原来反应体系中添加一些试剂,这些试剂必须不与酶作用也不影响酶活性,同时又能与酶反应物迅速作用,产生可以被直接测定的物质,典型的例子是Ellman的胆碱酯酶测定法,底物为硫代乙酰胆碱,酶水解产物硫代胆碱与添加的二硫代硝基苯甲酸(DTNB)作用立刻生成黄色化合物,可在412nm用分光光度法连续监测。实际工作中,更多的是在反应体系中加入另一酶试剂。进行适当的酶促反应,完全可以胜任上述工作。目前酶偶联法已经成为应用最广、最频繁测酶活性浓度的方法。最简单的酶偶联反应为以下模式:Ex为所要测定的酶,A、B二物质分别为其底物和产物,对此二物质变化,无法直接监测,此时可加入其它酶,其底物为Ex的产物B,其反应产物C可直接监测,这样通过第二个酶反应有可能推测出第一个酶的活性浓度,外加的第二个酶称之为指示酶Ei。如果一些酶反应找不到合适的指示酶与其直接偶联,此时往往可以加入另一种酶,将二者连接起来,模式如下:将这种联接的酶称之为辅助酶(Ea)。个别情况可能使用二种乃至二种以上的辅助酶。酶偶联反应与一般酶反应的一个重要区别处在于其有一个明显的延滞期。酶偶联反应一开始只存在着底物A,不存在指示酶的反应,随着产物B的出现和增加,指示酶反应随之加快,Ex和Ei反应速度相等,也就是达到稳态。从酶反应开始至稳态期间,指示酶反应较慢且不稳定,称为延滞期。显然这期间指示酶反应速度不能代表测定酶量多少。设计或选择酶测定方法时,如果用酶偶联法,延滞期越短越好,测定时间一定要避开此期。是不是所有类型的酶偶联反应都可用来测酶活性浓度?回答是否定的。因为测酶的活性浓度是依据测定酶反应速度——△A/△t或△B/△t求出。在酶偶联法,此值无法直接求出,而是通过测定指示酶反应△C/△t间接求出,要使酶偶联法测得的酶活性浓度准确可靠,则Vind=Vx。换言之,指示酶的最大反应速度必须等于或接近测定酶的最大反应速度。当测定酶的反应速度明显大于指示酶,此时A很快转变为B,由于指示酶反应慢,中间产物B大量推积,最终产物产生速度明显慢于底物A的消失速度。当指示酶速度加大后,中间产物B堆积减小,指示酶反应速率偏差程度也变小。只有当指示酶大量存在时,出现产物B就能将其迅速变为C。可以看出在延滞期后(即B达到高峰后的时期),C和A的变化速度非常一致。也就是只有在些情况下,才是测定酶浓度的理想条件。从理论上说,用酶偶联反应测酶活性浓度时,最好条件应是测定酶反应为限速反应。动力学上为零级反应,而指示酶为一级反应,酶反应速度与指示酶底物浓度相关。(二)指示酶、辅助酶的种类和浓度指示酶、辅助酶的种类:常规化验中常用的酶偶联法中,多以脱氢酶为指示酶,在常规化验中的自动分析仪几乎无一例外都有340nm波长,通过NAD(P)H系统可以很方便地监测到指示酶反应。但从理论上说,往往可以有不止一种偶联方法,只要设法使偶联反应中最后一个是指示酶反应,前面已提到测CK可以正向逆向二个方向建立二种不同酶偶联的反应。又如在丙氨酸转氨基酶(ALT)测定法中,正向反应后产生丙酮酸和谷氨酶,目前最常用的是用乳酸脱氢酶与丙酮酸偶联反应,伴有NADH下降。但也可以用谷氨酸脱氢酶与谷氨酸作用,伴有NADH生成。总之,酶偶联法为实验室工作者开辟了一个广阔前景。在设计和选择测定酶活性浓度方法时,应该创造更新的方法,而不应拘泥于书本上的方法。在选择时首先应考虑方法的特异性。在ALT方法,测定丙酮酸显然优于测谷氨酸,因为多种氨基转移酶都能产生谷氨酸,而只有ALT产生丙酮酸。还有干扰反应或副反应,在ALT测定中,由于正常以及病理血清中含有一定量丙酮酸,将受到它的干扰,又由于底物中含有大量α-酮戊二酸,可被血中谷氨酸脱氢酶作用消耗NADH。其次应考虑酶偶联反应的合理性,如能直接与指示酶偶联,就没有必要加入辅助酶,所选用的指示酶、辅助酶除了应选Km小的酶(这样容易使它们催化反应速度大大超过测定酶反应速度),还必须考虑指示酶、辅助酶是在测定酶的“最适条件”下工作,此时往往不是指示酶、辅助酶的最适条件,如二者差异太大不利于整个酶系统的反应,例如乳酸脱氢酶最适pH为7.4,而丙氨酸氨基转移酶最适pH也是7.4,乳酸脱氢酶作为指示酶比谷氨酸脱氢酶更为合适,因后者最适pH为8.4。如最后制成试剂盒,则还需从经济角度选择一些价廉物美,又易取材、纯化得到的酶制剂。(三)指示酶、辅助酶的浓度从上节描述中可以知道建立一个合适的酶偶联反应体系,不是很容易的指示酶,辅助酶的反应要能准确反映出测定酶含量,中间产物必须低,延滞期必须短,要作到此点,这些工具酶用量很大,但用量过大经济上不合算,所以在酶偶联测定法中,选用适当量的指示酶是一个重要的问题。一般可用反复试验法,即试验性地选用不同量的指示酸直到偶联酶反应中指示酶反应速度不随工具酶的增加而升高,并在所选用的“最适条件”下,指示酶反应速度和酶活性浓度成正比例。这种方法工作量大,而且不一定能得到最适结果,较好的办法是可先从理论上进行计算,得出一个大约结果,然后在此范围内进行试验,这样可以节约时间和精力。最简单的方法是根据Vx/(Km)x=Vi/(Km)i的比值来选择指示酶的用量Vi,式中Vx为测定酶的测定上限,(Km)x和(Km)i分别是测定酶和指示酶的米氏常数;有人计算过当比值为1:100时,测定值低4%;如改为1:10时,指示酶的反应速度将比测定酶反应速度慢28%,如增加到1:1000,则误差只有0.7%。这是因为,当我们用酶偶联反应体系测酶活性浓度时,测定酶的反应必须是体系中的限速反应,工具酶所催化的最大反应速度必须远远大于测定酶,由于工具酶所催化的反应必须在中间产物浓度很低条件下进行,并且将其很快转变为最终产物,反应体系中不应有中间产物堆积,否则将导致误差。下面举一实例,在肌酸激酶测定法中,CK的Km为2.4mmol/L,指示酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶的Km为0.27mmol/L,如我们将CK测定上限定为450μ/L(实际测定时标本稀释60倍,实际为7.5μ/L),如希望上述比例为1:100。代入上式:Vi=3.1×10-3×min-1×0.27mmol×1=0.835×10-3×mmol×min-1=0.835U如反应体系为1ml,求出在此反应体系中只需0.835U的6-磷酸葡萄糖脱氢酶即可。另一法可以根据米氏方程式来计算,在酶偶联反应中,指示酶催化速度(Vi)的米氏方程式为:以天冬氨酸氨基转移酶(AST)为例希望中间产物P浓度很低,定为0.001mmol/L,指示酶苹果酸脱氢酶。Km为0.0165mmol/L,如设定AST上限为300U/L(标本为1:12稀释,实测上限为25U/L)。代入上式:Vi=0.0014mmol min-1=1.4U得1.4U,如反应体系为3ml,则试剂中苹果酸脱氢酶用量为466U/L,目前试剂中用量为600U/L。从以上计算来看,试剂中用量是足够的。在酶偶联反应体系中,不可避免会出现延滞期,在测定酶时希望此延滞期愈短愈好,此时可利用Mcclure介绍的计算法计算出一定延滞期时所需指示酶的量。Mcclure假定在下面酶偶联反应中:第一个反应为零级反应,第二个反应为一级反应,且中间产物B浓度远小于指示酶的Km,即B
通过推导,可得dB/dt=k1-k2B上式积分得:当t足够大时,e-k2t→0,此时B浓度不变达到稳态,此时B的浓度为Bss,代入上式:首先可得 Bss=k1/k2以及ln[1-B/Bss] =-k2t同时在稳态下,k2是指示酶正向反应的常数,在一级反应中k2=Vi/(Km)i。令F=B/Bss,此即在时间t时产物B为其稳态浓度的百分数,一般选用0.99。最后可得公式:Vi=例如在CK测定中,指示酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶Km为0.11mmol/L,我们希望延滞时间为1分钟,则指示酶用量为:总之,从上式可清楚看到,延滞时间t与指示酶的Km成正比例,用量成反比。四、酶活性的浓度单位50年代以前酶活性浓度单位的命名混乱,常以方法提出者的姓氏来命名,例如淀粉酶的Somogyi单位,碱性磷酸酶的King单位等等,定义参差不齐,给临床医师带来很大不便,尤其在建立“连续监测法”测酶后,大量酶应用于临床,此混乱现象更为突出。1963年国际生化协会通过广泛讨论,提出一个国际单位定义来表示酶量的多少,即1分钟能转化1微摩尔底物(μmolmin-1)的酶量为一个国际单位,以IU表示之,由于意见不一致,至今尚未指定酶反应温度,而同一量的酶,在不同温度时间为1分钟所转化底物的量将有明显差异。为避免临床上误认为只要是同一国际单位的酶量在国际上无论何处所测结果都应一致,目前大多数实验工作者常省略国际二字(简写也由IU改为U)。临床上测定的不是酶的绝对量而是浓度,1963年并未明确规定用ml或L表示体积。旧的文献中可见到mU/ml,或U/L。目前在临床化学中,几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。我国由于近年来大量用自动分析仪和连续监测法测酶,已逐步不再使用各种古老单位,而使用U/L来表示酶活性浓度。近年来国际上大力推广SI制,我国已明确SI制为法定计量单位制,SI制中酶活性单位为Katal,即1秒中转化1个摩尔底物(mol s-1)的酶量,Katal对体液中酶量而言显然过大,常用单位为ukatal或nkatal。上述国际单位和katal间关系如下:1U=1μmol min-1=16.67nmol s-1=16.67nkatal在我国不论实验室还是临床医师对katal都不太熟悉,如报告使用katal/L报告酶结果时,最好同时注明相应的U/L。(一)连续监测法中酶活性浓度的计算前面已提到连续监测法优点之一是计算方便,不需作标准曲线或标准管,用分光光度计监测酶反应过程时,很容易求出反应体系每分钟吸光度变化,根据摩尔吸光系数可求出△A相当测定物质变化的微摩尔数,由于临床医师需要知道的是标本中而不是反应体系中酶的浓度,计算中要考虑标本的稀释倍数,假如比色杯光径不是1cm,则还应考虑光径不同对△A的影响,这样整个计算公式应为:此中ε为摩尔(线性)吸光体系(mol-1·L·cm-1)△A为吸光度变化v为标本体积(ml)V为反应体系体积(ml)L为光径(cm)在实际测定中后面几项皆为常数,所以上式常简化为:(二)常数K的意义和设置在测酶时,常数K值的选择是很重要的。此值过高虽然测定的线性范围较宽,但重复性差,反之,虽然精密度好,但线性窄。此问题与仪器测定的嗓音(noise)密切相关,自动分析仪吸光度读数嗓音一般都需控制在0.001,也就是仪器须保证对同一溶液反复进行测定时,吸光度误差最好控制0.001上下,虽然此值不大,但已可能使测定结果产生1/1000K值的误差,如K值为6000,代入上式,则每分钟测定吸光度如有0.001微小变化,结果将是出现上下6U/L的误差,对于一此参考值较低的酶,如转氨酶而言显然太大,临床医师无法容忍这么大差异。K值设置的首先出发点应是测定酶的判断值或参考值上限,应保证这些值测定的可靠,所以转氨酶的常数K一般在3000左右,不少人宁愿在1500左右,另外还应考虑到测定时间,一些半自动分析仪测定时间短到0.5分,此时0.001嗓音对每分钟△A误差将是0.002,反之,测定时间延长到2分钟,误差也小一半,也就是说,如测定时间长,则K值可以设置大一些,如测定时间只有0.5分钟,K值一般不超过4000。改变K值最方便的途径就是改变标本稀释度,稀释倍数愈大,K值愈大。(三)常数K值的检验摩尔吸光系数(ε)对一定物质而言常是一个定值,但在一些外界条件影响下也会有所变化。最明显例子是对硝基酚,随pH不同,颜色差异明显,当pH>10时,405nm处其ε为18500,在pH7.0,ε下降为9400,颜色下降几乎一半。温度变化时,也会对NAD(P)H的ε产生一些影响。当波长大于334nm时,随温度升高,同一波长的ε值会轻度下降。同时ε值是指用分光光度法,也就是在近似单色光的光源条件下才能成立,实际上大多数自动分析仪使用的是干涉滤片,波峰值可能出现差异,个别的半波宽可能为10nm乃至更大。由于杂散光的存在,会明显改变ε值,假如再考虑到注加系统的误差,实测K值很可能与理论K值不一致。Onuki检测了三台Hitachi-7150型自动分析仪测AST的K值分别为-5466、-5421、-5559。而理论K值为-6111则结果约增加为1.12倍。测定实际的K值不是一件困难的事,目前有些自动分析仪已有相应的软件和试剂可以进行检测。事实上对一些性质稳定的物质如对硝基酚、对硝基苯胺,可以用高纯试剂配成标准品或直接购买可靠的校准品,将它们作为标本进行酶的测定,根据已知标准品的浓度和吸光度变化就可计算出实际K值,但此法不适用于测与NAD(P)H反应有关酶测定的K值。因为NAD(P)H不稳定,此时可使用测葡萄糖的紫外分光光度法试剂盒,对已知浓度的葡萄糖标准品进行终点法测定,此法产生与葡萄糖相等摩尔数的NAD(P)H,故不难从吸光度变化求出K值,也有人用乳酸脱氢酶测已知量的丙酮酸来求K值。五、连续监测法中的干扰因素及其控制大多数测定标本不是纯酶制剂,而是体液或组织液。其中除了测定酶外,还存在着其它酶和各种物质,如使用酶偶联反应,在反应体系中又外添了大量的各种酶制剂,因此在反应体系中可能出现一些我们不希望的副反应或旁路反应,这些都有可能对测定反应产生干扰。(一)其它酶和物质的干扰如组织匀浆中往往含有NADH-细胞色素C还原酶,它将干扰各种还原酶的测定。临床酶测定中最典型的例子是血液中丙酮酸对丙氨酸氨基转移酶测定的干扰,由于反应体系中含有大量乳酸脱氢酶和NADH,可与丙酮酸反应消耗NADH,引起340nm处吸亮度下降,假如将此NADH下降也算为ALT活性将引起误差。其它如红细胞中腺苷酸激酶(AK)对CK测定的干扰,在CK的酶偶联体系中ADP是CK底物,但它又同时是AK的底物,二个酶反应都产生ATP,在工具酶(已糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶)作用下都产生NADH引起340nm处吸光度上升,其结果是CK测定结果偏高,为避免此种干扰,所以在反应体系中加入AK的抑制剂AMP和二腺苷酸5′磷酸。(二)工具酶的污染目前试剂中所用的试剂酶多从动物组织或细菌中提取,不可避免地会污染有其它酶,如不注意此问题,会引起不正确结果,例如丙酮酸羧化酶催化下列反应:可加入苹果酸脱氢酶和NADH进行测定,将草酰乙酸转变为苹果酸,并将NADH转变为NAP+。如果工具酶苹果酸脱氢酶不纯,含有乳酸脱氢酶,也可以作用底物之一的丙酮酸,同时消耗NADH,这样就无法准确测定丙酮酸羧化酶活性。更有甚者,有些工具酶中就混有测定酶,这种情况下,将产生很高的本底。所以所用的工具酶必须很纯,并检查污染酶的含量,例如测定天冬氨酸氨基转移酶所用的苹果酸脱氢酶中所含杂的AST时,按IFCC规定不应超过0.005%。(三)非酶反应有些底物不稳定,没有酶的作用就能自行反应,例如ALP的底物磷酸对硝基酚配成的底物溶液,室温放置过夜,即自行水解释放出对硝基成黄色。又如测醛缩酶时,其底物醛类化合物可以和NAD+起非酶反应产生一种具有类似NADH吸收光谱的化合物,给测定带来困难。(四)分析容器的污染如冲洗不当,分析容器和管道中混杂有各种物质,可能影响酶活性,如微量重金属可使酶失活,残留的表面活性剂可能抑制酶活性。(五)沉淀形成使用光学法监测酶反应时,如有沉淀形成或组织匀浆中颗粒的下沉都会引起吸光度变化,引起测定结果误差,此情况常见于底物溶解度低而反应体系中底物浓度偏高。可见于用γ-谷氨酰对硝基苯胺为底物测GGT时。对上述的一些问题常可通过试剂空白管检出并加以校正。不同厂家的ALT,AST试剂盒由于杂酶存在,试剂空白管可以测出多少不等转氨酶活性,个别可达5U/L以上,这种试剂无法使用,较好的试剂盒也在2U/L左右。如不作试剂空白管对结果加以校正,所测结果将偏高,用半自动分析仪测定酶时特别要注意作试剂空白管,有时还需作标本对照管,例如测ALT时为除去GLD的干扰,可以在底物溶液中不加入丙氨酸,与标本中GLD作用引起NADH下降。解决这些问题另一个有效措施就是不用单一试剂测酶活性,改用双试剂,先加的第一试剂常不含底物或底物之一,但含有所有其它成分,与标本作用一段时间待吸光度停止变化后,再加入底物开始测定酶的反应。}

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