根据醋酸纤维电泳条带分析薄膜电泳结果,指出每个条带代表的是哪种蛋白质,并对γ球蛋白的粗提液进行讨论?

1.掌握电泳分离蛋白质的基本原理。

2.掌握醋酸纤维薄膜电泳分离蛋白质技术。

1.电泳使带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动;颗粒体积越小、表面越光滑、所带电荷越多,泳动越快;凭借在电场中的移速的差异,不同的颗粒自然分离成数条区带。

2.血清蛋白可细分为五种蛋白,各自具有不同的体积大小、形状和等电点;因此,通过电泳以及染色后,即可观察到清晰的色带。

1.泡膜,将薄膜浸泡在缓冲液[1]中。

2.上样,上样前,用滤纸吸干[2]薄膜[3]上多余的缓冲液; 后用塑料片垂直蘸取血清,在毛面上距离薄膜一端约2cm处上样一次即可,盖完后能观察到一个浅浅的样品条;上样后,样品会被薄膜吸收。[3]

3.放样,用两个镊子分别夹住薄膜两端,把膜放到滤纸桥上,并确保样品端位于负极端[4],同时保持血清样品位于滤纸桥内侧[5];毛面朝下放置[6],并用镊子在两端拉紧薄膜[7]

4.电泳,在恒压电源下经过一个小时左右后,取下薄膜。

5.染色,将薄膜完全浸入到氨基黑染色剂中,染成深蓝色,染色时间至少五分钟(多个薄膜同时染色时要防止黏连,待前一条完全浸没时,才能放入下一条)。

6.漂洗[8],用三份漂洗液依次进行漂洗,各漂洗三分钟,漂洗好后的深蓝色条带即为蛋白质条带,可观察到蛋白质分离的结果。

7.观察分析所得的蛋白质条带。

1.用镊子戳条带中部的样品区,可能会刮落蛋白,出现斑驳,最好通过两端持拿。

2.染料挥发后条带颜色会变淡,用胶带纸封住会保持较好。

3.多个薄膜同时进行实验时,最好做有标记。

4.吸干薄膜上多余的缓冲液后及时点样,防止薄膜完全干燥。

1.蛋白质条带的深浅和粗细对比显示着含量比。

2.蛋白质电泳需要介质,介质提供了一个不仅可以使蛋白质泳动而且可使蛋白质具有不同泳动速率的环境。

3.蛋白质颗粒在电场中移动速率与颗粒的体积大小(越是小又轻越快)、形状(越是光滑越快)、表面电荷多少(越多越快)有关。

[1]缓冲液浸湿薄膜,提供了PH8.6(PH>PI)的缓冲环境,使蛋白质带上电荷。

[2]防止血清样本流动

[3]薄膜的一面较光滑,铺有防水膜(防止样品泄漏),只有摩擦面又称毛面才可以上样。可在灯光下判断,光泽较暗的一面是毛面,即上样面。

[4]滤纸桥有正负极,因PH>PI,蛋白质颗粒带负电

[5]血清若与滤纸桥接触,则会被吸收;若位于外侧,则无法成功进行电泳

[6]防止薄膜上的缓冲液干掉,失去缓冲液,蛋白质就会失去电荷,无法泳动

[7]防止下塌,因蛋白质是水平逃脱

[8]染色后,整个薄膜都是深蓝色,仍无法观察到蛋白质条带情况,因此需通过漂洗洗去背景色。

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第1篇:理化生实验考试作文1000字

时间过得真快,中考的第一场——理化生实验考试不知不觉就要来到了。

生活中突然多了一种紧张的气氛,老师要求每周二中午到学校做实验,孩子的午休就这样被占用了。一开始,我并没有觉得这场只有15分的考试有多么重要,但考试前一个月,孩子班上一位同学的妈妈打给我的电话,顿时让我忐忑不安起来。

同学妈妈说:“咱班有同学报实验培训班了,因为学校的实验器材毕竟有限,不可能每次每个孩子都亲手*作,三科36个实验,就那么几次实验课,万一哪个实验孩子不熟练,孩子考试抽签抽到了,那可要丢好几分啊,你儿子想不想报实验班,要是想报的话,给我说一下,我在实验班上给你们占个名额,那个班是几个热心的家长组织的,都是咱班的孩子……”我一听,有点发懵,实验还要报班?一时不知如何回话,只好说:“这个,报班的事,我跟儿子商量一下吧。”

孩子放学回家,我把那位家长的话告诉了他,孩子说:“报什么班呀?总共就那几个实验,我就在学校练就可以了,再说了,老师见我做得好,还让我当了小组长了,组里同学做的时候我在旁边看,有不对的地方我给他们指出来,等于我又练了一遍,你放心吧,我会做得很好的。”看着孩子信心满满的样子,我便回了同学妈妈的电话,说孩子不必要报班了。

4月12日下午,是孩子参加考试的时间。

送孩子去十九中考试的路上,我挺紧张的,他倒没事人

第2篇:生化实验试题参考

篇一:生物化学实验考试试题(完整版)

1.测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法),(紫外吸收法),(folin-*试剂法(或lowry法))和(考马斯亮

2.cat能把h2o2分解为h2o和o2,其活*大小以(以一定时间内分解的h2o2量)来表示,当cat

与h2o2反应结束,再用(*量法)测定未分解的h2o2。

3.聚*烯酰*凝胶电泳是以(聚*烯酰*凝胶)作为载体的一种区带电泳,这种凝胶是由(acr)和交联剂(bis)在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备(分离)胶,其自由基的引发剂是(ap),催化剂是(temed);光聚合法适于制备大孔径的(浓缩)胶,催化剂是(核黄素)。

4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学*质进行分类,可分成以下几种:(吸附层析),(分配层析),(离子交换层析),(凝胶层析)和(亲和层析)。

5.使用离心机离心样品前,必须使离心管(等重)且对称放入离心机。

6.米氏常数可近似表示酶和底物亲合力,km愈小,表示e对s的亲合力愈(大),km愈大,表示e对s

7.分光光度计在使用之前必须预热,注意预热及样品槽空时必须__(打开)____(打开、合上)样品池翻盖。

8.cat是植物体内重要的酶促防御系统之一,其

第3篇:实验考试300字优秀作文

试对于别的学科,无非是拿着纸笔看卷答题,可是实验考试是非常细心、非常讲究的,它的每一个步骤都很重要,就像建房子一样先把地基打好,才能把房子建好更坚固,有一步之差房子就会塌,所以要上科学实验课上一定要注意听讲。

考试的钟声渐渐来临了,“铃、铃、铃”响了起来,我的心剧烈地跳了几下,走到了三楼实验室,心跳得更快了,好像水“咕、咕、咕”地在沸腾,要涌上来。终于轮到我,我忐忑不安地来到实验桌前。我做的实验是“测量不规则石块的体积”。在做的过程中先把烧杯里的水倒进量筒里,还得低下头看一看是多少毫升水,200毫升,我在一张纸上记下来,再小心翼翼地把系上线的绳子慢慢的放进量筒中,生怕溅出水花丢了分,低下头看一看205毫升我又记下来,再把绳子拿出来再把两数相减5毫升,等于5立方厘米就是石头的体积,最后把水倒进水槽中就完成了。

这次科学实验考试,考察了我的细心和认真,我爱上了实验课。实验课真是好玩,但是你要在玩中学会方法和乐趣这样你就能成功

第4篇:化学实验*作考试试题参考

唐山市初中毕业与升学化学实验*作考试试题

试题一、实验室制取二氧化碳

内容:制取一集气瓶二氧化碳,并对其进行检验。

用品:试管架,试管(20×200),试管刷,铁架台(带铁夹),带导气管的单孔橡胶塞,

镊子,火柴,木条,酒精灯,水槽,集气瓶,玻璃片,烧杯(500ml,烧杯口加网罩,用于回收反应后的稀盐*和石灰石)。

石灰石碎块,稀盐*,澄清石灰水。

要求:1.检查装置的气密*。

2.制取一集气瓶二氧化碳。

3.检验收集到的气体。

试题二、常见金属的*质

内容:观察镁、铁、铜的颜*,验*这三种金属的某些化学*质。

用品:镊子,砂纸,坩埚钳,石棉网(用于回收加热后的铜片),酒精灯,火柴,试管架,

试管3支(15×150),烧杯2个(50ml,一个用于盛放打磨后的金属样品,一个用于铁钉和硫*铜溶液的反应),烧杯2个(500ml,烧杯口加网罩,一个用于回收反应后的盐*和金属,一个用于回收反应后的铁钉和硫*铜溶液)。

镁条,铁钉,铜片,稀盐*,硫*铜溶液。

要求:1.用砂纸打磨金属样品,观察金属的颜*。

2.加热铜片,观察铜片表面的变化。

3.分别向盛有镁条、铁钉、铜片的试管中加入稀盐*。

4.将铁钉放入硫*铜溶液中。

试题三、配制*化*溶液

第5篇:考验作文1000字

考验六(1)班 张婉婷你玩过用书当桥墩,用白纸当桥的游戏吗?星期六的上午,我们才高八斗班的老师举行了一场智慧的游戏——架纸桥比赛。首先老师宣布比赛规则:“四人为一组,将一张白纸做成桥面,再在用搭在纸盒或书做成的‘桥墩’上,可以借助一些辅助材料,而“桥面”上至少要承载一本书。”刚听完游戏规则,同学们跃跃欲试,我也兴奋不已,心想:这有什么难的?瞧我的!随着老师说:“准备,开始。”我们组一位同学快速把纸折了几道,其他同学则把几本书放摞在桌子上。然后,我们把折了几道的纸轻轻地放在两边的书上,再把几本书压在纸上,将‘桥面’牢牢地固定在‘桥墩’上。眼看“桥”搭好了,胜利之手已在向我们招手,我们迫不及待地将一本书小心翼翼放在折好的“桥面”上,谁知书刚一放在“桥面”上,“桥”就塌了,顿时,刚爬上脸上的笑容消失了,怎么才能成功呢?我们都在全神贯注地思考,脸上都呈现出焦急的神情。同时,我看见其他组得意洋洋的神情,感受到他们兴奋不已的心情,就知道他们成功了。这时,我们急得像热锅上的蚂蚁一样,恨不得像刘谦一样,马上变一座桥出来。突然,老师说:“好了,停了。”我们的时间到了,第一场游戏我们失败了。第二轮架纸桥游戏快开始了,而这轮不能借助任何辅助材料时。难度增加了!我们更着急了。老师一声令下,我们开始架纸桥,

第6篇:精选化学实验考试试题

第7篇:生物化学与分子生物学实验原理试题

1.用数学术语描述荧光定量pcr的定量依据。

2.等速电泳的原理以及定*定量。

3.在sds-page中,请给出浓缩胶,分离胶,上样缓冲液,电泳缓冲液的ph值(4分)并说明原因。

4.用sds-page对某样品中的目的蛋白进行分离时,发现此蛋白大小符合目的蛋白的大小,但是却并不能确定是否为目的蛋白,因此需要进一步地对此种蛋白进行液相质谱分析。请简述实验步骤。

5.由于gcms具有高灵敏*,在加入溶剂时都能够检测到峰型。那么应该如何设计gcms实验,检测某种样品中是否含有需要的蛋白,请设计实验。

6.酵母双杂交的实验原理以及优缺点。

7.电渗流形成原理以及影响因素。

8.简述原核限制修饰系统以及二型限制*内切酶。

9.简述蛋白质纯化的基本策略。

10.简述体外定向进化技术的核心技术环节。

11.pet系统成为大肠杆菌中医院蛋白表达首选载体的原因。

12.以ch4为例,请简要说明质谱中4个分子量的名称以及含义

第8篇:作文考试不等于道德测验1000字

今年的全国高考作文是一篇材料作文。材料的大意是,有一位登山者,途中遇到了暴风雪,正当他寻求自救之时,却碰到了一个冻僵的人,他的心灵经过“翻*倒海的思量之后”,选择将这个冻僵的人救醒,最后两人双双脱险。作文提示中说,“也许人人不一定能够碰到这样的生死抉择,但是我们生活中也会面临一些与触动心灵有关的选择,在这种情况下,我们应该怎样选择?为什么会作这样的选择?请以‘心灵的选择’为话题写一篇作文”。?

我不知道,如果考生在作文中说趋利避害是人的本*,遇到这种情况他会选择保全自我,或者考生讲述现实生活中“触动心灵”的选择时,并没有表达出舍己为人的高尚情*,这样的作文会不会被判为“跑题”或中心思想错误??

估计没有多少考生敢这样写,实际上他们别无选择,不管内心是怎样想的,他们都只能乖乖地就范于命题者预设的主题和思路,用崇高、正义、勇敢、无私等冠冕堂皇的辞藻去抒写“毫不利己、专门利人”的动人篇章。

实际上,即使是成年人面对这样生与死、为己与为人的非此即彼的道德考险,也很难作出果敢的选择,何况是18岁上下的高中毕业生?他们中间有多少人切身体验过“触动心灵”的选择?又有多少考生能写出真情实感来?我真的很同情考生们,本来高考的压力就非常大,现在又要他们在闷热的考场里,在短短的时间里化解道德难题,消除道德焦虑

第9篇:中学理化生组实验工作计划范文

全面贯彻党的教育方针,本着素质教育,能力培养,全面完成教学任务而开足实验,上好实验课,整体提高教学质量和水平。

1、严格按大纲要求,根据进度表安排好演示实验,学生实验。

通过实验培养学生的观察能力、分析能力、思维能力、动手能力,2、积极培养学生的学科思想及科学研究的方法、步骤。

3、利用现有条件,积极开展第二课堂活动,为丰富学生的生活作出贡献。

1、加强全体实验教师的专项培训,强化他们的理论学习,提高其实验*作能力。

2、理化生教师充分利用现有设备、仪器创造条件上好实验课,提高实验开出率,其中分组实验、演示实验开出率要达到100%。

3、教师在组织教学要尽量做到:能在实验室教学的,不在教室;能用实物演示的,不用标本;能用电化教学手段的,不用空口说教;能让学生自己动手*作的,不让教师演示。

4。加强教师组织实验教学的能力培养,

5.推行学生创造*实验改革,加强学生探索*实验设计能力的培养。

6、继续加强学生实验*作能力的培养,要求教师能让学生自己做的,教师一定让学生自己做,下学期举行一次学生实验*作能力比赛。

7、理化生实验教师,充分利用我校的实验器材设备,精心准备实验,并制订切实可行的工作计划,每次实验要有实验记录,总结和改进意见,增强服务意识。

第10篇:评论:作文考试不等于道德测验1000字

 信息来源:工人日报天讯在线 

我不知道,如果考生在作文中说趋利避害是人的本*,遇到这种情况他会选择保全自我,或者考生讲述现实生活中“触动心灵”的选择时,并没有表达出舍己为人的高尚情*,这样的作文会不会被判为“跑题”或中心思想错误??

估计没有多少考生敢这样写,实际上他们别无选择,不管内心是怎样想的,他们都只能乖乖地就范于命题者预设的主题和思路,用崇高、正义、勇敢、无私等冠冕堂皇的辞藻去抒写“毫不利己、专门利人”的动人篇章。

实际上,即使是成年人面对这样生与死、为己与为人的非此即彼的道德考险,也很难作出果敢的选择,何况是18岁上下的高中毕业生?他们中间有多少人切身体验过“触动心灵”的选择?又有多少考生能写出真情实感来?我真的很同情考生们,本来高考的压力就非常大,现在又要他们在闷热的考场里,在短短的时间里化解道德难题,消除道德焦虑,作出“心灵的选择”,这简直是一种近乎残忍的苛求。

在这种情况下,考生们惟一可选择的,就是编造虚假的道德故事,抒发虚泛的道德情感,表达虚夸的道德理想。我不能说考生们选择舍身取义是错误的,更不能说所有考生说的都是假话,但至少大多数考生是不敢写出自己真实想法的。

回忆一下,近两年的高考作文(全国卷)试题,都和伦理道德有关

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姓 名: 学 号: 专业年级: 组 别:

生物化学与分子生物学实验教学中心

实验名称 实验日期 合作者 评分

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量

1、1、学习醋酸纤维薄膜电泳得基本原理与操作方法; 1、2、了解电泳技术得一般原理;

1、3、掌握电泳分离血清蛋白质及其定性定量得方法。

2、1、血清中各种蛋白质得等电点不同,一般都低于pH7、4。它们在pH8、6得缓冲液中均解离带负电荷,在电场中向正极移动.由于血清中各种蛋白质分子大小、形状及所带得电荷量不同,在醋酸纤维素薄膜上电泳得速度也不同。因此可以将它们分离

为清蛋白(Albumin)、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带.

2、2、血清中不同蛋白质得等电点、分子量及含量

血清蛋白质 等电点 分子量 占总蛋白得%

α1-球蛋白 5、06 200,000 2~5

血清蛋白带负电荷,在电场中向正极移动。 预测血清蛋白电泳区带图

血清蛋白依次分为清蛋白,球蛋白得α1、α2、β、γ五个区带

2、3、①膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带;②各色带蛋白质含量与染料结合量基本成正比;③可将各色带剪开,分别溶于碱性溶液中;④用分光光度法计算各种蛋白质得百分数。

3、1、1、实验试剂:①样品:健康人血清(新鲜、无溶血);②巴比妥―巴比妥钠缓冲液(pH8、6,离子强度0、06mol/L);③氨基黑10B染色液;④漂洗液;⑤洗脱液:0、4mol/NaOH溶液。

3、1、2、实验器材:①V-1100分光光度计(×1);②恒温水浴箱(×1);③试管(×6)、试管架(×1);④1000μL加样枪(×1)、加样枪架(×1);⑤醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm);⑥培养皿(×5);⑦点样器或载玻片(×1);⑧平头镊子(×2);⑨剪刀(×1);⑩电泳槽(×1);?直流稳压电泳仪(×1) 3、2、实验步骤

1.准备与点样:①取2×8cm得膜条;②亚光面距一端1、5cm处取一点样线;③充分浸透在巴比妥缓冲液中;④取出膜条,用滤纸吸去多余得缓冲液;⑤点样器下端粘上薄层血清;⑥垂直点样。 点样示意图: 注意:点样线尽量点得细窄而均匀. ― 小组标记 样品标记 8cmm点样线 点样区 (粗面) + 2cm 2.电泳:①放置膜条(点样面向下,点样端置于阴极);②膜条贴紧滤纸,拉直膜条;③平衡五分钟;④通电(调节电压120v/电流,时间:45~60 min);③关闭电源. 1、电泳槽解剖图: 5cm

3、染色、漂洗:①通电完毕;②取出膜条;③浸于染色液(氨基黑10B)中,5min;④取出膜条,浸于漂洗液;⑤反复漂洗2次,直至漂净;⑥滤纸吸干薄膜。 4、定量(洗脱比色法)(因实验室等原因,未做) 四、结果与讨论:

本次实验得到得图谱只能够清晰得瞧出清蛋白与γ―球蛋白得区带,其余无法区别。原因可能如下:

①醋酸纤维薄膜质量不足

②薄膜过湿,样品扩散迅速,导致样品分离不成区带. ③点样太少,区带显色不明显. ④电泳时间不足.

⑤薄膜在缓冲液中浸泡得时间不足。

⑤取出电泳后得薄膜过程中曾不慎将薄膜掉到地上。

⑥染色时,因为现场混乱,可能导致醋酸纤维薄膜不就是一张一张放入染色液得,在染色固定前,薄膜与薄膜之间重叠,造成薄膜上还未固定得血清蛋白彼此粘连.

1.电泳时,点样端置于电场得正极还就是负极?为什么?

答:点样端置于电场得负极。因为人体血清得蛋白质会因电槽中溶质呈碱性而带负电,要成功分离出各类各类蛋白质,理应将点样端置于电场得负极.

2.电泳后各区带应明显分开,如分离不清或不整齐,试分析其可能存在得原因. 答:①醋酸纤维薄膜质量不足;②薄膜过湿,样品扩散迅速,导致样品分离不成区带;③点样太少,区带显色不明显;④染色时,醋酸纤维薄膜不就是一张一张放入染色液得,在染色固定前,薄膜与薄膜之间重叠,造成薄膜上还未固定得血清蛋白彼此粘连。⑤电泳时电压,电流或电泳过小或时间不够,造成区带未分离。

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